Foreasy Taq DNA Polymerase
ລາຍລະອຽດຊຸດ:
◮ຄວາມສະເພາະສູງ: enzyme ມີກິດຈະກໍາການເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນທີ່ແນ່ນອນ.
◮ການຂະຫຍາຍໄວ: 10 ວິນາທີ/kb.
◮ແມ່ແບບທີ່ສາມາດປັບຕົວໄດ້ສູງ: ສາມາດໃຊ້ເພື່ອຂະຫຍາຍ GC ທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງ, ຮູບແບບການຂະຫຍາຍ DNA ທີ່ມີຄວາມຫຍຸ້ງຍາກຫຼາຍ.
◮ຄວາມຊື່ສັດທີ່ເຂັ້ມແຂງ: Taq Enzyme ທໍາມະດາ 6 ເທົ່າ.
◮ສະຖຽນລະພາບຄວາມຮ້ອນທີ່ເຂັ້ມແຂງ: ມັນສາມາດຖືກວາງໄວ້ທີ່ 37 ° C ສໍາລັບອາທິດແລະຮັກສາກິດຈະກໍາຫຼາຍກ່ວາ 90%.
ລາຍລະອຽດ
Foreasy Taq DNA Polymerase ແມ່ນ enzyme Taq ໃຫມ່ທີ່ສະແດງອອກໃນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍວິສະວະກໍາ Escherichia coli ໂດຍເຕັກໂນໂລຢີການປະສົມພັນທຸກໍາ.enzyme ຕົວຂອງມັນເອງມີກິດຈະກໍາການເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນທີ່ແນ່ນອນແລະສາມາດນໍາໃຊ້ສໍາລັບ PCR ທໍາມະດາແລະ qPCR;ມັນມີກິດຈະກໍາ 5'→3' DNA polymerase ແລະ 5'→3' ກິດຈະກໍາ exonuclease, ແຕ່ບໍ່ມີກິດຈະກໍາ 3'→5' exonuclease.
ອົງປະກອບຊຸດ
| ອົງປະກອບ | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
| Foreasy Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 5000 U (1 ມລ) | 50 KU (10 ມລ) | 500 KU (100 ມລ) |
| 2× ບັຟເຟີປະຕິກິລິຍາ Taq | 25ມລ×5 | 250 ມລ × 5 | 500 ມລ × 25 |
ຄຸນນະສົມບັດແລະຂໍ້ດີ
- ຄວາມສະເພາະສູງ: enzyme ມີກິດຈະກໍາການເລີ່ມຕົ້ນທີ່ແນ່ນອນຮ້ອນ.
- ການຂະຫຍາຍໄວ: 10 ວິນາທີ/kb.
- ແມ່ແບບທີ່ສາມາດປັບຕົວໄດ້ສູງ: ສາມາດໃຊ້ເພື່ອຂະຫຍາຍ GC ທີ່ມີຄ່າສູງ, ຄວາມຫຍຸ້ງຍາກໃນການຂະຫຍາຍແມ່ແບບ DNA.
- ຄວາມຊື່ສັດທີ່ເຂັ້ມແຂງ: Taq Enzyme ທໍາມະດາ 6 ເທົ່າ.
- ຄວາມສະຖຽນລະພາບຄວາມຮ້ອນທີ່ເຂັ້ມແຂງ: ມັນສາມາດໄດ້ຮັບການວາງໄວ້ທີ່ 37 ° C ສໍາລັບອາທິດແລະຮັກສາກິດຈະກໍາຫຼາຍກ່ວາ 90%
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຊຸດ
ລະບົບ PCR/qPCR ຕ່າງໆ ແລະລະບົບ PCR ໂດຍກົງ
ການຂະຫຍາຍ PCR ຂອງຊິ້ນສ່ວນ DNA
ການຕິດສະຫຼາກ DNA
ການຈັດລໍາດັບ DNA
PCR A-ຫາງ
U ຄໍານິຍາມ
1U: ຈໍານວນເອນໄຊທີ່ຕ້ອງການເພື່ອລວມເອົາ 10 nmol ຂອງ deoxynucleotides ເຂົ້າໄປໃນບັນຫາທີ່ບໍ່ລະລາຍຂອງອາຊິດໂດຍໃຊ້ DNA ເຊື້ອອະສຸຈິຂອງປາແຊນມອນທີ່ຖືກກະຕຸ້ນເປັນແມ່ແບບ / primer ສໍາລັບ 30 ນາທີທີ່ 74 ° C.
ສະພາບປະຕິກິລິຍາ
| ອຸນຫະພູມ | ເວລາ | ຮອບວຽນ |
| 37°C | 5 ນາທີ | 1 |
| 94°C | 5 ນາທີ | 1 |
| 94°C | 10 ວິນາທີ | 35 |
| 60°C | 10 ວິນາທີ | |
| 72°C | 20 ວິ/ກິບ | |
| 72°C | 2 ນາທີ | 1 |
ການເກັບຮັກສາ
-20 ± 5 ° C ສໍາລັບ 2 ປີຫຼືຢູ່ທີ່ -80 ° C ສໍາລັບການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວ.
ບໍ່ມີສັນຍານການຂະຫຍາຍ
1.The Taq DNA Polymerase ໃນຊຸດສູນເສຍການເຄື່ອນໄຫວເນື່ອງຈາກການເກັບຮັກສາບໍ່ຖືກຕ້ອງ ຫຼືໝົດອາຍຸຂອງຊຸດ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາຂອງຊຸດ;ເພີ່ມປະລິມານທີ່ເໝາະສົມຂອງ Taq DNA Polymerase ໃຫ້ກັບລະບົບ PCR ຫຼືຊື້ຊຸດ PCR ແບບສົດໆໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ.
2.ມີຫຼາຍຕົວຍັບຍັ້ງຂອງ Taq DNA Polymerase ໃນແມ່ແບບ DNA.
ຄໍາແນະນໍາ: Repurify ແມ່ແບບຫຼືຫຼຸດຜ່ອນຈໍານວນຂອງແມ່ແບບທີ່ນໍາໃຊ້.
3.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄຳແນະນຳ: ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ຂອງ 2× Real PCR Mix ທີ່ພວກເຮົາໃຫ້ແມ່ນ 3.5mM.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສໍາລັບບາງ primers ແລະແມ່ແບບພິເສດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+ ອາດຈະສູງກວ່າ.ດັ່ງນັ້ນ, ທ່ານສາມາດເພີ່ມ MgCl2 ໂດຍກົງເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+.ແນະນໍາໃຫ້ເພີ່ມ Mg2+ 0.5mM ໃນແຕ່ລະຄັ້ງສໍາລັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
4.The PCR ເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ, ແລະລໍາດັບ primer ຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງລໍາດັບ primer ແລະ primer ບໍ່ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ;ຖ້າສັນຍານການຂະຫຍາຍບໍ່ດີ, ພະຍາຍາມຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມ annealing ແລະປັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ທີ່ເຫມາະສົມ.
5.ປະລິມານຂອງແມ່ແບບແມ່ນຫນ້ອຍເກີນໄປຫຼືຫຼາຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ປະຕິບັດການເຈືອຈາງແບບເສັ້ນເສັ້ນຂອງແມ່ແບບ, ແລະເລືອກຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງແມ່ແບບທີ່ມີຜົນກະທົບ PCR ທີ່ດີທີ່ສຸດສໍາລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
NTC ມີມູນຄ່າ fluorescence ສູງເກີນໄປ
1.Reagent ການປົນເປື້ອນທີ່ເກີດຈາກການດໍາເນີນການ.
ຄໍາແນະນໍາ: ທົດແທນດ້ວຍທາດປະສົມໃຫມ່ສໍາລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
2.Contamination ເກີດຂຶ້ນໃນລະຫວ່າງການກະກຽມຂອງລະບົບຕິກິຣິຍາ PCR.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຊ້ມາດຕະການປ້ອງກັນທີ່ຈໍາເປັນໃນເວລາປະຕິບັດງານ, ເຊັ່ນ: ການໃສ່ຖົງມືຢາງ, ໃຊ້ປາຍທໍ່ທີ່ມີການກັ່ນຕອງ, ແລະອື່ນໆ.
3.The primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ, ແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງ primers ຈະເຮັດໃຫ້ການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ແມ່ນສະເພາະ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເຊື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນພວກມັນດ້ວຍ primers ໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
primer dimer ຫຼືການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະ
1.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄຳແນະນຳ: ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ຂອງ 2× Real PCR EasyTM Mix ທີ່ພວກເຮົາໃຫ້ແມ່ນ 3.5 mM.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສໍາລັບບາງ primers ແລະແມ່ແບບພິເສດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+ ອາດຈະສູງກວ່າ.ດັ່ງນັ້ນ, ທ່ານສາມາດເພີ່ມ MgCl2 ໂດຍກົງເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+.ແນະນໍາໃຫ້ເພີ່ມ Mg2+ 0.5mM ໃນແຕ່ລະຄັ້ງສໍາລັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
2.The PCR annealing ອຸນຫະພູມຕ່ໍາເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ເພີ່ມອຸນຫະພູມ PCR annealing ໂດຍ 1 ℃ຫຼື 2 ℃ໃນແຕ່ລະຄັ້ງ.
3.ຜະລິດຕະພັນ PCR ແມ່ນຍາວເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຄວາມຍາວຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ແທ້ຈິງຄວນຈະຢູ່ລະຫວ່າງ 100-150bp, ບໍ່ເກີນ 500bp.
4.The primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ, ແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງ primers ຈະນໍາໄປສູ່ຮູບລັກສະນະຂອງ amplification ສະເພາະ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເຊື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນພວກມັນດ້ວຍ primers ໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
5.ລະບົບ PCR ແມ່ນບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຫຼືລະບົບມີຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR ຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການກວດສອບຫຼຸດລົງ.ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະໃຊ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທີ່ແນະນໍາໂດຍເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານເພື່ອດໍາເນີນການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
ການເຮັດເລື້ມຄືນທີ່ບໍ່ດີຂອງມູນຄ່າປະລິມານ
1. ເຄື່ອງມືເຮັດວຽກຜິດປົກກະຕິ.
ຄໍາແນະນໍາ: ອາດຈະມີຄວາມຜິດພາດລະຫວ່າງແຕ່ລະຂຸມ PCR ຂອງເຄື່ອງມື, ສົ່ງຜົນໃຫ້ເກີດໃຫມ່ທີ່ບໍ່ດີໃນລະຫວ່າງການຈັດການຫຼືການກວດພົບອຸນຫະພູມ.ກະລຸນາກວດເບິ່ງຕາມຄໍາແນະນໍາຂອງເຄື່ອງມືທີ່ສອດຄ້ອງກັນ.
2.ຄວາມບໍລິສຸດຕົວຢ່າງບໍ່ດີ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ສະອາດຈະນໍາໄປສູ່ການແຜ່ພັນທີ່ບໍ່ດີຂອງການທົດລອງ, ເຊິ່ງລວມທັງຄວາມບໍລິສຸດຂອງແມ່ແບບແລະ primers.ມັນເປັນສິ່ງທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ຈະຊໍາລະແມ່ແບບຄືນໃຫມ່, ແລະ primers ໄດ້ຖືກເຮັດຄວາມສະອາດທີ່ດີທີ່ສຸດໂດຍ SDS-PAGE.
3.The PCR ການກະກຽມລະບົບແລະເວລາເກັບຮັກສາແມ່ນຍາວເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຊ້ລະບົບ PCR ໃນເວລາຈິງສໍາລັບການທົດລອງ PCR ທັນທີຫຼັງຈາກການກະກຽມ, ແລະຢ່າປ່ອຍໃຫ້ມັນຄ້າງໄວ້ດົນເກີນໄປ.
4.The PCR ເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ, ແລະລໍາດັບ primer ຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງລໍາດັບ primer ແລະ primer ບໍ່ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ;ຖ້າສັນຍານການຂະຫຍາຍບໍ່ດີ, ພະຍາຍາມຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມ annealing ແລະປັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ທີ່ເຫມາະສົມ.
5.ລະບົບ PCR ແມ່ນບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຫຼືລະບົບມີຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR ຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການກວດສອບຫຼຸດລົງ.ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະໃຊ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທີ່ແນະນໍາໂດຍເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານເພື່ອດໍາເນີນການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
