Direct RT-qPCR Kit III
ລາຍລະອຽດຊຸດ:
◮Direct RT-qPCR Kit, ໂດຍໃຊ້ Foreasy Reverse Transcriptase ແລະ Foreasy HS Taq DNA Polymerase ພັດທະນາໂດຍ Foregene, ມີ buffer ຕິກິຣິຍາທີ່ເປັນເອກະລັກ, ເຮັດໃຫ້ຊຸດນີ້ມີຄວາມຕ້ານທານທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້, ແລະມັນສາມາດທົດສອບຕິກິຣິຍາໂດຍກົງໂດຍໃຊ້ລະບົບ Foregene Lysis ເປັນແມ່ແບບ.ຊຸດນີ້ສາມາດນຳໃຊ້ສຳລັບຊຸດກວດຫາອາຊິດນິວຄລີອິກ COVID-19 ແລະ ການພັດທະນາຊຸດກວດຫາອາຊິດນິວຄລີອິກເຊື້ອແບັກທີເຣັຍອື່ນໆ.
ລາຍລະອຽດ
Direct RT-qPCR Kit ສະຫນອງ RT-qPCR buffer ແຍກຕ່າງຫາກ (ມີ Foreasy HS Taq DNA polymerase ປະສົມ) ແລະປະສິດທິພາບສູງ.Foreasy Reverse Transcriptase(MMLV),ເຮັດໃຫ້ມັນສະດວກສໍາລັບການສ້າງຊຸດ back-end ແລະການປັບລະບົບ, ພາຍໃນການກວດສອບງ່າຍດາຍ.
Direct RT-qPCR Kit, ໂດຍໃຊ້ Foreasy Reverse Transcriptase ແລະ Foreasy HS Taq DNA Polymerase ພັດທະນາໂດຍ Foregene, ມີ buffer ຕິກິຣິຍາທີ່ເປັນເອກະລັກ, ເຮັດໃຫ້ຊຸດນີ້ມີຄວາມຕ້ານທານທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້, ແລະມັນສາມາດທົດສອບຕິກິຣິຍາໂດຍກົງໂດຍໃຊ້ລະບົບ Foregene Lysis ເປັນແມ່ແບບ.ຊຸດນີ້ສາມາດນຳໃຊ້ສຳລັບຊຸດກວດຫາອາຊິດນິວຄລີອິກ COVID-19 ແລະ ການພັດທະນາຊຸດກວດຫາອາຊິດນິວຄລີອິກເຊື້ອແບັກທີເຣັຍອື່ນໆ.
ຊຸດນີ້ສາມາດເປັນສ່ວນປະກອບຂອງຜະລິດຕະພັນ IVD ໂດຍກົງ, ໃຊ້ງ່າຍແລະໄວ.ມັນພຽງແຕ່ຕ້ອງການການຢັ້ງຢືນທີ່ງ່າຍດາຍ, ໂດຍບໍ່ມີການພັດທະນາອີກເທື່ອຫນຶ່ງ.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
500T, 50,000T
ອົງປະກອບຊຸດ
| ເນື້ອໃນຊຸດ (ລະບົບປະຕິກິລິຍາ 20 μL) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 ທ | 50,000 ທ | |
| Foreasy RTranscriptase ຕະຫຼອດ(200 U/μL) | 50 ມລ×1 | 1 ມລ×5 |
| 2 × qPCR ໂດຍກົງປະສົມ-Taqman | 1 ມລ × 5 | 500 ມລ×1 |
| ຄໍາແນະນໍາ | 1 | 1 |
ຂັ້ນຕອນການດໍາເນີນງານ
A: ການກະກຽມຂອງແມ່ແບບແລະ reagent
1. ກະກຽມແມ່ແບບ RNA ທີ່ກຽມໄວ້ (ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ Foregene Total RNA Isolation Kit series kit ເພື່ອສະກັດແລະຊໍາລະແມ່ແບບ RNA) ຫຼືຕົວຢ່າງຜະລິດຕະພັນ cracking (ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ລະບົບ Foregene Lysis), primers ສະເພາະ (10 μM) ແລະອຸປະກອນບໍລິໂພກທີ່ກ່ຽວຂ້ອງອື່ນໆ.
2. ເອົາ 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O ແລະ 20× ROX Reference Dye (ຖ້າຕ້ອງການ) ໃສ່ໃນກ່ອງດ້ວຍນໍ້າກ້ອນ, ເຮັດໃຫ້ສິ່ງເຫຼົ່ານີ້ລະລາຍຕາມທໍາມະຊາດ, ແລະປະສົມຄ່ອຍໆ.
B: ການກະກຽມລະບົບ RT-qPCR
ໄດ້ຮັບເຄິ່ງຫນຶ່ງຂອງປະລິມານຂອງຕິກິຣິຍາ buffer ຂອງລະບົບຕິກິຣິຍາ (ຕົວຢ່າງ, ຖ້າປະລິມານຂອງລະບົບແມ່ນ 20 μL, ມັນຈໍາເປັນຕ້ອງໄດ້ຮັບ 10 μL 2 × Direct RT-qPCR Buffer.). ສໍາລັບປະລິມານທີ່ສອດຄ້ອງກັນຂອງ enzyme, ພວກເຮົາແນະນໍາວ່າM-MLV: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ 10-30 U/20 μL,ຕາກDNA polymerase:ລະບົບປະຕິກິລິຍາ 1-2 U/20 μLນີ້ແມ່ນຄໍາແນະນໍາຂອງພວກເຮົາ, ທ່ານຄວນທົດສອບແລະປັບມັນ), ເພີ່ມແມ່ແບບ RNA, primers ສະເພາະແລະ probes, ແລະເພີ່ມ RNase-Free ddH2O ເຖິງ 20 μL.ການກະກຽມສະເພາະຂອງລະບົບຕິກິຣິຍາ RT-qPCR ສາມາດອ້າງອີງໃສ່ຕາຕະລາງ 1 ຕໍ່ໄປນີ້.
ຕາຕະລາງ 1: ການກະກຽມລະບົບ RT-qPCR
| ອົງປະກອບ | ປະລິມານ | ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍ |
| 2× Direct RT-qPCR Buffer | 10 ມລ | 1× |
| Foreasy Reverse Transcriptase(MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| ສົ່ງຕໍ່ primer (10 μM) | 0.8 ມລ | 50-900nM |
| ຢາງຮອງພື້ນ (10 μM) | 0.8 ມລ | 50-900nM |
| Probe (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| ແມ່ແບບ (RNA ຫຼື Lysate) | X μL | |
| 20× ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| ປະລິມານທັງໝົດ | 20 ມລ |
ຫມາຍເຫດ: Forward Primer ແລະ Reverse Primer ແມ່ນ primer ສະເພາະຂອງ gene ເປົ້າຫມາຍ.ລະບົບຂອງ qPCR ສາມາດຖືກປັບຕາມແບບທົດລອງແລະ PCR.ພວກເຮົາແນະນໍາ 400nM ສໍາລັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສຸດທ້າຍຂອງ primers ສ່ວນໃຫຍ່.ປັບປະລິມານຂອງ primers ແລະ probes ສະເພາະຕາມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນການກະກຽມແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສຸດທ້າຍທີ່ແນະນໍາ, ກະລຸນາ.
1*: ເລືອກຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍທີ່ເຫມາະສົມຂອງສີຍ້ອມຜ້າອ້າງອິງ ROX ອີງຕາມເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງສີຍ້ອມ ROX ທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານທົ່ວໄປແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງຕໍ່ໄປນີ້:
| ເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານ | ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສຸດທ້າຍຂອງ ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/ຂັ້ນຕອນທີໜຶ່ງ,ແລະອື່ນໆ | 1 × (ຕົວຢ່າງ, ເພີ່ມ 1μl 20 × ROX Reference Dye ໃນລະບົບຕິກິຣິຍາ 20 μL) |
| ABI 7500, 7500 ໄວ, Stratagene Mx3000P, Mx3005P ແລະ Mx4000, ແລະອື່ນໆ. | 0.5× (ຕົວຢ່າງ, ເພີ່ມ 0.5μl 20 × ROX Reference Dye ໃນລະບົບຕິກິຣິຍາ 20 μL) |
| ເຄື່ອງມື Roche PCR, ເຄື່ອງມື Bio-Rad PCR, Eppendorf quantitative PCR ເຄື່ອງມື, ແລະອື່ນໆ. | ໂດຍບໍ່ມີການຍ້ອມສີອ້າງອີງ ROX |
ການເກັບຮັກສາແລະອາຍຸການເກັບຮັກສາ
ຊຸດຄວນໄດ້ຮັບການເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -20 ± 5℃.ມັນຄວນຈະຖືກເກັບໄວ້ໃນຕູ້ເຢັນອຸນຫະພູມ -20 ℃ທັນທີ.ໄລຍະເວລາທີ່ຖືກຕ້ອງແມ່ນ 2 ປີຖ້າມັນຖືກເກັບໄວ້ໃນສະພາບທີ່ເຫມາະສົມ.
