Foreasy HS Taq DNA Polymerase
ລາຍລະອຽດຊຸດ:
◮ຄວາມສະເພາະສູງ: enzyme ທີ່ມີກິດຈະກໍາການເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນສູງ.
◮ການຂະຫຍາຍໄວ: 10 ວິນາທີ/kb.
◮ການປັບຕົວແບບແມ່ແບບສູງ: ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອປະສິດທິຜົນຂະຫຍາຍຕົວສູງGCຄ່າແລະແມ່ແບບ DNA ທີ່ຫຍຸ້ງຍາກໃນການຂະຫຍາຍ.
◮ຄວາມສັດຊື່ຢ່າງແຂງແຮງ: ຄວາມສັດຊື່ມີ 6 ເທົ່າof Enzyme Taq ທໍາມະດາ.
ລາຍລະອຽດ
Foreasy HS Taq DNA Polymerase ແມ່ນ enzyme Taq ໃຫມ່ທີ່ສະແດງອອກໃນເຊື້ອແບັກທີເຣັຍວິສະວະກໍາ Escherichia coli ໂດຍເຕັກໂນໂລຊີ recombination gene.ຫຼັງຈາກ enzyme ໄດ້ຖືກປະຕິບັດດ້ວຍຂະບວນການພິເສດ, ມັນ'ກິດຈະກໍາ s ແມ່ນຖືກຍັບຍັ້ງກ່ອນທີ່ຈະກະຕຸ້ນຄວາມຮ້ອນ, ດັ່ງນັ້ນການຍັບຍັ້ງການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະທີ່ເກີດຈາກການ annealing ທີ່ບໍ່ສະເພາະຂອງ primers ຫຼື primer dimers ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂອຸນຫະພູມຕ່ໍາ.ຜະລິດຕະພັນນີ້ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບ PCR React ສະເພາະສູງໄອອອນ, M ultiple x PCR , ເນື້ອໃນ GC ສູງ (> 60%) ,ກັບໂຄງປະກອບການຮອງຫຼືອື່ນໆgenom ພື້ນຖານທີ່ເຂັ້ມແຂງicsຂະຫຍາຍຕົວແລະ genom ຂະຫນາດໃຫຍ່icsການກວດຫາການຂະຫຍາຍ.ເອນໄຊມີກິດຈະກໍາ 5' → 3' DNA polymerase ແລະ 5' → 3' ກິດຈະກໍາ exonuclease, ແຕ່ບໍ່ມີກິດຈະກໍາ 3' → 5' exonuclease.
ອົງປະກອບຊຸດ
| ອົງປະກອບ | IM-01021 | IM-01022 | IM-01023 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 5000 U (1 ມລ) | 50 KU (10 ມລ) | 500 KU (100 ມລ) |
| 2× ບັຟເຟີປະຕິກິລິຍາ Taq | 25ml ×5 | 250 ມລ × 5 | 500 ມລ × 25 |
ຄຸນນະສົມບັດແລະຂໍ້ດີ
- ຄວາມສະເພາະສູງ: enzyme ທີ່ມີກິດຈະກໍາການເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນສູງ.
- ການຂະຫຍາຍໄວ: 10 ວິນາທີ/kb.
- ການປັບຕົວແບບແມ່ແບບສູງ: ສາມາດນໍາໃຊ້ເພື່ອປະສິດທິຜົນຂະຫຍາຍຕົວສູງGCຄ່າແລະແມ່ແບບ DNA ທີ່ຫຍຸ້ງຍາກໃນການຂະຫຍາຍ.
- ຄວາມສັດຊື່ຢ່າງແຂງແຮງ: ຄວາມສັດຊື່ມີ 6 ເທົ່າof Enzyme Taq ທໍາມະດາ.
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຊຸດ
- ລະບົບ PCR / qPCR ຕ່າງໆແລະລະບົບ PCR ໂດຍກົງ
- PCR Amplified DNA Fragment
- ເຄື່ອງໝາຍ DNA
- ການຈັດລໍາດັບ DNA
- PCR ບວກ A ຫາງ
ຄໍານິຍາມກິດຈະກໍາ
1U: ປະລິມານຂອງເອນໄຊທີ່ຕ້ອງການເພື່ອລວມເອົາ 10 nmol ຂອງDNAເຂົ້າໄປໃນບັນຫາທີ່ລະລາຍອາຊິດໂດຍນໍາໃຊ້ activated salmon sperm DNA ເປັນ template / primer, 74 ° C, 30 ນາທີ.
ສະພາບປະຕິກິລິຍາ
| ອຸນຫະພູມ | ເວລາຕິກິຣິຍາ | ເວລາຮອບວຽນ |
| 37°C | 5 ນທ | 1 |
| 94°C | 5 ນທ | 1 |
| 94°C | 10 ວິນາທີ | 40 |
| 60°C | 10 ວິນາທີ |
ຫມາຍເຫດ:ສໍາລັບລະບົບ 10 µL ແລະ 20 µL, ຕື່ມປະລິມານນ້ໍາມັນແຮ່ທາດທີ່ເທົ່າທຽມກັນຖ້າເຄື່ອງເຮັດຄວາມຮ້ອນບໍ່ມີຝາປິດຄວາມຮ້ອນ.
ເງື່ອນໄຂປະຕິກິລິຍາ PCR ແຕກຕ່າງກັນໄປຕາມເງື່ອນໄຂໂຄງສ້າງຂອງແມ່ແບບ, primers, ແລະອື່ນໆ.ໃນການດໍາເນີນງານສະເພາະ, ມັນຈໍາເປັນຕ້ອງໄດ້ອອກແບບເງື່ອນໄຂຕິກິຣິຍາທີ່ດີທີ່ສຸດ, ລວມທັງອຸນຫະພູມ annealing, ການຂະຫຍາຍເວລາ, ແລະອື່ນໆ, ອີງຕາມເງື່ອນໄຂສະເພາະເຊັ່ນ: ປະເພດແມ່ແບບ, ຂະຫນາດຂອງຊິ້ນສ່ວນເປົ້າຫມາຍ, ລໍາດັບພື້ນຖານຂອງຊິ້ນສ່ວນຂະຫຍາຍ, ແລະເນື້ອໃນ GC ແລະຄວາມຍາວຂອງ primer.
ການເກັບຮັກສາ
-20 ± 5 ° C ສໍາລັບ 2 ປີຫຼືຢູ່ທີ່ -80 ° C ສໍາລັບການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະຍາວ.
ບໍ່ມີສັນຍານການຂະຫຍາຍ
1.The Taq DNA Polymerase ໃນຊຸດສູນເສຍການເຄື່ອນໄຫວເນື່ອງຈາກການເກັບຮັກສາບໍ່ຖືກຕ້ອງ ຫຼືໝົດອາຍຸຂອງຊຸດ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາຂອງຊຸດ;ເພີ່ມປະລິມານທີ່ເໝາະສົມຂອງ Taq DNA Polymerase ໃຫ້ກັບລະບົບ PCR ຫຼືຊື້ຊຸດ PCR ແບບສົດໆໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ.
2.ມີຫຼາຍຕົວຍັບຍັ້ງຂອງ Taq DNA Polymerase ໃນແມ່ແບບ DNA.
ຄໍາແນະນໍາ: Repurify ແມ່ແບບຫຼືຫຼຸດຜ່ອນຈໍານວນຂອງແມ່ແບບທີ່ນໍາໃຊ້.
3.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄຳແນະນຳ: ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ຂອງ 2× Real PCR Mix ທີ່ພວກເຮົາໃຫ້ແມ່ນ 3.5mM.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສໍາລັບບາງ primers ແລະແມ່ແບບພິເສດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+ ອາດຈະສູງກວ່າ.ດັ່ງນັ້ນ, ທ່ານສາມາດເພີ່ມ MgCl2 ໂດຍກົງເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+.ແນະນໍາໃຫ້ເພີ່ມ Mg2+ 0.5mM ໃນແຕ່ລະຄັ້ງສໍາລັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
4.The PCR ເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ, ແລະລໍາດັບ primer ຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງລໍາດັບ primer ແລະ primer ບໍ່ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ;ຖ້າສັນຍານການຂະຫຍາຍບໍ່ດີ, ພະຍາຍາມຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມ annealing ແລະປັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ທີ່ເຫມາະສົມ.
5.ປະລິມານຂອງແມ່ແບບແມ່ນຫນ້ອຍເກີນໄປຫຼືຫຼາຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ປະຕິບັດການເຈືອຈາງແບບເສັ້ນເສັ້ນຂອງແມ່ແບບ, ແລະເລືອກຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງແມ່ແບບທີ່ມີຜົນກະທົບ PCR ທີ່ດີທີ່ສຸດສໍາລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
NTC ມີມູນຄ່າ fluorescence ສູງເກີນໄປ
1.Reagent ການປົນເປື້ອນທີ່ເກີດຈາກການດໍາເນີນການ.
ຄໍາແນະນໍາ: ທົດແທນດ້ວຍທາດປະສົມໃຫມ່ສໍາລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
2.Contamination ເກີດຂຶ້ນໃນລະຫວ່າງການກະກຽມຂອງລະບົບຕິກິຣິຍາ PCR.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຊ້ມາດຕະການປ້ອງກັນທີ່ຈໍາເປັນໃນເວລາປະຕິບັດງານ, ເຊັ່ນ: ການໃສ່ຖົງມືຢາງ, ໃຊ້ປາຍທໍ່ທີ່ມີການກັ່ນຕອງ, ແລະອື່ນໆ.
3.The primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ, ແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງ primers ຈະເຮັດໃຫ້ການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ແມ່ນສະເພາະ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເຊື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນພວກມັນດ້ວຍ primers ໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
primer dimer ຫຼືການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະ
1.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄຳແນະນຳ: ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ຂອງ 2× Real PCR EasyTM Mix ທີ່ພວກເຮົາໃຫ້ແມ່ນ 3.5 mM.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສໍາລັບບາງ primers ແລະແມ່ແບບພິເສດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+ ອາດຈະສູງກວ່າ.ດັ່ງນັ້ນ, ທ່ານສາມາດເພີ່ມ MgCl2 ໂດຍກົງເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+.ແນະນໍາໃຫ້ເພີ່ມ Mg2+ 0.5mM ໃນແຕ່ລະຄັ້ງສໍາລັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
2.The PCR annealing ອຸນຫະພູມຕ່ໍາເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ເພີ່ມອຸນຫະພູມ PCR annealing ໂດຍ 1 ℃ຫຼື 2 ℃ໃນແຕ່ລະຄັ້ງ.
3.ຜະລິດຕະພັນ PCR ແມ່ນຍາວເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຄວາມຍາວຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ແທ້ຈິງຄວນຈະຢູ່ລະຫວ່າງ 100-150bp, ບໍ່ເກີນ 500bp.
4.The primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ, ແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງ primers ຈະນໍາໄປສູ່ຮູບລັກສະນະຂອງ amplification ສະເພາະ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເຊື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນພວກມັນດ້ວຍ primers ໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
5.ລະບົບ PCR ແມ່ນບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຫຼືລະບົບມີຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR ຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການກວດສອບຫຼຸດລົງ.ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະໃຊ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທີ່ແນະນໍາໂດຍເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານເພື່ອດໍາເນີນການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
ການເຮັດເລື້ມຄືນທີ່ບໍ່ດີຂອງມູນຄ່າປະລິມານ
1. ເຄື່ອງມືເຮັດວຽກຜິດປົກກະຕິ.
ຄໍາແນະນໍາ: ອາດຈະມີຄວາມຜິດພາດລະຫວ່າງແຕ່ລະຂຸມ PCR ຂອງເຄື່ອງມື, ສົ່ງຜົນໃຫ້ເກີດໃຫມ່ທີ່ບໍ່ດີໃນລະຫວ່າງການຈັດການຫຼືການກວດພົບອຸນຫະພູມ.ກະລຸນາກວດເບິ່ງຕາມຄໍາແນະນໍາຂອງເຄື່ອງມືທີ່ສອດຄ້ອງກັນ.
2.ຄວາມບໍລິສຸດຕົວຢ່າງບໍ່ດີ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ສະອາດຈະນໍາໄປສູ່ການແຜ່ພັນທີ່ບໍ່ດີຂອງການທົດລອງ, ເຊິ່ງລວມທັງຄວາມບໍລິສຸດຂອງແມ່ແບບແລະ primers.ມັນເປັນສິ່ງທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ຈະຊໍາລະແມ່ແບບຄືນໃຫມ່, ແລະ primers ໄດ້ຖືກເຮັດຄວາມສະອາດທີ່ດີທີ່ສຸດໂດຍ SDS-PAGE.
3.The PCR ການກະກຽມລະບົບແລະເວລາເກັບຮັກສາແມ່ນຍາວເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຊ້ລະບົບ PCR ໃນເວລາຈິງສໍາລັບການທົດລອງ PCR ທັນທີຫຼັງຈາກການກະກຽມ, ແລະຢ່າປ່ອຍໃຫ້ມັນຄ້າງໄວ້ດົນເກີນໄປ.
4.The PCR ເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ, ແລະລໍາດັບ primer ຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງລໍາດັບ primer ແລະ primer ບໍ່ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ;ຖ້າສັນຍານການຂະຫຍາຍບໍ່ດີ, ພະຍາຍາມຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມ annealing ແລະປັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ທີ່ເຫມາະສົມ.
5.ລະບົບ PCR ແມ່ນບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຫຼືລະບົບມີຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR ຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການກວດສອບຫຼຸດລົງ.ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະໃຊ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທີ່ແນະນໍາໂດຍເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານເພື່ອດໍາເນີນການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
