The organization keeps on the procedure concept “scientific management, high-quality and efficiency primacy, buyer supreme for China Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Our business is dedicated to giving customers with significant and secure top quality products at each customer services at aggressive price and our customers.
ອົງ​ການ​ຈັດ​ຕັ້ງ​ສືບ​ຕໍ່​ກ່ຽວ​ກັບ​ແນວ​ຄວາມ​ຄິດ​ຂັ້ນ​ຕອນ​ການ "ການ​ຄຸ້ມ​ຄອງ​ວິ​ທະ​ຍາ​ສາດ​, ຄຸນ​ນະ​ພາບ​ສູງ​ແລະ​ປະ​ສິດ​ທິ​ພາບ​, ຜູ້​ຊື້​ສູງ​ສຸດ​ສໍາ​ລັບ​ການ​.ຈີນ Taq DNA Polymerase ແລະ Qpcr, ບໍລິສັດຂອງພວກເຮົາມີຄວາມເຂັ້ມແຂງອຸດົມສົມບູນແລະມີລະບົບເຄືອຂ່າຍການຂາຍທີ່ຫມັ້ນຄົງແລະສົມບູນແບບ.ພວກ​ເຮົາ​ປາດ​ຖະ​ຫນາ​ວ່າ​ພວກ​ເຮົາ​ສາ​ມາດ​ສ້າງ​ການ​ພົວ​ພັນ​ທຸ​ລະ​ກິດ​ທີ່​ດີ​ກັບ​ລູກ​ຄ້າ​ທັງ​ຫມົດ​ຈາກ​ພາຍ​ໃນ​ແລະ​ຕ່າງ​ປະ​ເທດ​ບົນ​ພື້ນ​ຖານ​ຜົນ​ປະ​ໂຫຍດ​ເຊິ່ງ​ກັນ​ແລະ​ກັນ​.
ຫຼັກການການອອກແບບ primer PCR ໃນເວລາຈິງ

Forward Primer ແລະ Reverse Primer

ສໍາລັບ PCR ທີ່ແທ້ຈິງ, ການອອກແບບ primer ແມ່ນມີຄວາມສໍາຄັນຫຼາຍ.Primers ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບສະເພາະແລະປະສິດທິພາບຂອງການຂະຫຍາຍ PCR, ແລະສາມາດໄດ້ຮັບການອອກແບບໂດຍອ້າງອີງໃສ່ຫຼັກການດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:

• ຄວາມຍາວຂອງ primer: 18-30bp.
• ເນື້ອໃນ GC: 40-60%.
• ຄ່າ Tm: ຊອບແວອອກແບບ primer ເຊັ່ນ Primer 5 ສາມາດໃຫ້ຄ່າ Tm ຂອງ primer.ຄ່າ Tm ຂອງ primers ເທິງນ້ໍາແລະລຸ່ມຄວນຈະໃກ້ຊິດເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້.ສູດການຄິດໄລ່ Tm ຍັງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້: Tm = 4 °C (G + C) + 2 ° C (A + T).ເມື່ອປະຕິບັດ PCR, ອຸນຫະພູມຕ່ໍາກວ່າຄ່າ primer Tm ຂອງ 5 ° C ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນເລືອກເປັນອຸນຫະພູມ annealing (ການເພີ່ມຂຶ້ນທີ່ສອດຄ້ອງກັນຂອງອຸນຫະພູມ annealing ສາມາດເພີ່ມຄວາມສະເພາະຂອງຕິກິຣິຍາ PCR).
• ຜະລິດຕະພັນ Primers ແລະ PCR:

1. ການອອກແບບ primer PCR ຄວາມຍາວຜະລິດຕະພັນຂະຫຍາຍແມ່ນມັກ 100-150bp.
2. ການອອກແບບ primers ໃນເຂດໂຄງສ້າງຮອງຂອງແມ່ແບບຄວນໄດ້ຮັບການຫຼີກເວັ້ນຫຼາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້.
3. ຫຼີກລ້ຽງການສ້າງຖານເສີມ 2 ຫຼືຫຼາຍກວ່າລະຫວ່າງ 3′ ປາຍຂອງ primers ເທິງນ້ໍາແລະລຸ່ມນ້ໍາ.
4. Primer 3′ ຖານ terminal ບໍ່ສາມາດມີ 3 G ຫຼື C ຕິດຕໍ່ກັນເພີ່ມເຕີມ.
5. primers ຕົວເອງບໍ່ສາມາດມີໂຄງສ້າງເສີມ, ຖ້າບໍ່ດັ່ງນັ້ນໂຄງສ້າງ hairpin ຈະຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນ, ຜົນກະທົບຕໍ່ການຂະຫຍາຍ PCR.
6. ATCG ຄວນແຈກຢາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້ໃນລໍາດັບ primer, ແລະ 3′ terminal base ຄວນຖືກຫລີກລ້ຽງເປັນ T.

ເອກະສານຊ້ອນທ້າຍ1: ຄell DirectRT-qPCR ຊຸດສ່ວນປະກອບt ຊຸດເສີມ

1.Cell Lysis Solution

 The organization keeps on the procedure concept “scientific management, high-quality and efficiency primacy, buyer supreme for China Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Our business is dedicated to giving customers with significant and secure top quality products at each customer services at aggressive price and our customers.
ຜູ້ຜະລິດຈີນສໍາລັບຈີນ Taq DNA Polymerase ແລະ Qpcr, ບໍລິສັດຂອງພວກເຮົາມີຄວາມເຂັ້ມແຂງອຸດົມສົມບູນແລະມີລະບົບເຄືອຂ່າຍການຂາຍທີ່ຫມັ້ນຄົງແລະສົມບູນແບບ.ພວກ​ເຮົາ​ປາດ​ຖະ​ຫນາ​ວ່າ​ພວກ​ເຮົາ​ສາ​ມາດ​ສ້າງ​ການ​ພົວ​ພັນ​ທຸ​ລະ​ກິດ​ທີ່​ດີ​ກັບ​ລູກ​ຄ້າ​ທັງ​ຫມົດ​ຈາກ​ພາຍ​ໃນ​ແລະ​ຕ່າງ​ປະ​ເທດ​ບົນ​ພື້ນ​ຖານ​ຜົນ​ປະ​ໂຫຍດ​ເຊິ່ງ​ກັນ​ແລະ​ກັນ​.

ຫຼັກການການອອກແບບ primer PCR ໃນເວລາຈິງ

Forward Primer ແລະ Reverse Primer

ສໍາລັບ PCR ທີ່ແທ້ຈິງ, ການອອກແບບ primer ແມ່ນມີຄວາມສໍາຄັນຫຼາຍ.Primers ແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບສະເພາະແລະປະສິດທິພາບຂອງການຂະຫຍາຍ PCR, ແລະສາມາດໄດ້ຮັບການອອກແບບໂດຍອ້າງອີງໃສ່ຫຼັກການດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:

• ຄວາມຍາວຂອງ primer: 18-30bp.
• ເນື້ອໃນ GC: 40-60%.
• ຄ່າ Tm: ຊອບແວອອກແບບ primer ເຊັ່ນ Primer 5 ສາມາດໃຫ້ຄ່າ Tm ຂອງ primer.ຄ່າ Tm ຂອງ primers ເທິງນ້ໍາແລະລຸ່ມຄວນຈະໃກ້ຊິດເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້.ສູດການຄິດໄລ່ Tm ຍັງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້: Tm = 4 °C (G + C) + 2 ° C (A + T).ເມື່ອປະຕິບັດ PCR, ອຸນຫະພູມຕ່ໍາກວ່າຄ່າ primer Tm ຂອງ 5 ° C ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນເລືອກເປັນອຸນຫະພູມ annealing (ການເພີ່ມຂຶ້ນທີ່ສອດຄ້ອງກັນຂອງອຸນຫະພູມ annealing ສາມາດເພີ່ມຄວາມສະເພາະຂອງຕິກິຣິຍາ PCR).
• ຜະລິດຕະພັນ Primers ແລະ PCR:

1. ການອອກແບບ primer PCR ຄວາມຍາວຜະລິດຕະພັນຂະຫຍາຍແມ່ນມັກ 100-150bp.
2. ການອອກແບບ primers ໃນເຂດໂຄງສ້າງຮອງຂອງແມ່ແບບຄວນໄດ້ຮັບການຫຼີກເວັ້ນຫຼາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້.
3. ຫຼີກລ້ຽງການສ້າງຖານເສີມ 2 ຫຼືຫຼາຍກວ່າລະຫວ່າງ 3′ ປາຍຂອງ primers ເທິງນ້ໍາແລະລຸ່ມນ້ໍາ.
4. Primer 3′ ຖານ terminal ບໍ່ສາມາດມີ 3 G ຫຼື C ຕິດຕໍ່ກັນເພີ່ມເຕີມ.
5. primers ຕົວເອງບໍ່ສາມາດມີໂຄງສ້າງເສີມ, ຖ້າບໍ່ດັ່ງນັ້ນໂຄງສ້າງ hairpin ຈະຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນ, ຜົນກະທົບຕໍ່ການຂະຫຍາຍ PCR.
6. ATCG ຄວນແຈກຢາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້ໃນລໍາດັບ primer, ແລະ 3′ terminal base ຄວນຖືກຫລີກລ້ຽງເປັນ T.

ເອກະສານຊ້ອນທ້າຍ1: ຄell DirectRT-qPCR ຊຸດສ່ວນປະກອບt ຊຸດເສີມ

1.Cell Lysis Solution

ຄູ່ມືການສອນ:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman