ວັກຊີນ mRNA ແມ່ນຫຍັງ
ວັກຊີນ mRNA ໂອນ RNA ໄປຫາຈຸລັງຂອງຮ່າງກາຍເພື່ອສະແດງອອກແລະຜະລິດໂປຣຕີນ antigens ຫຼັງຈາກການດັດແປງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງໃນ vitro, ດັ່ງນັ້ນການເຮັດໃຫ້ຮ່າງກາຍຜະລິດພູມຕ້ານທານຕ້ານ antigen, ດັ່ງນັ້ນການຂະຫຍາຍຄວາມສາມາດຂອງພູມຕ້ານທານຂອງຮ່າງກາຍ.[1,3].
ຮູບທີ 1: ແຜນວາດແຜນພາບຜົນກະທົບຂອງການສັກຢາວັກຊີນ mRNA ໂດຍກົງ [2]
ການຈັດປະເພດຂອງວັກຊີນ mRNA
ວັກຊີນ mRNA ແບ່ງອອກເປັນສອງປະເພດ:ບໍ່ຊໍ້າກັນmRNA ແລະການຂະຫຍາຍຕົນເອງmRNA: mRNA ຂະຫຍາຍຕົນເອງບໍ່ພຽງແຕ່ເຂົ້າລະຫັດ antigen ເປົ້າຫມາຍ, ແຕ່ຍັງເຂົ້າລະຫັດ replication ທີ່ຊ່ວຍໃຫ້ intracellular RNA ຂະຫຍາຍແລະກົນໄກການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນ.ວັກຊີນ mRNA ທີ່ບໍ່ຊໍ້າກັນພຽງແຕ່ເຂົ້າລະຫັດ antigens ເປົ້າໝາຍ ແລະມີ 5' ແລະ 3' ພາກພື້ນທີ່ບໍ່ໄດ້ແປ (UTR).ພວກເຂົາເຈົ້າສະຫນອງການກະຕຸ້ນທີ່ສົມບູນແບບຂອງການປັບຕົວແລະພູມຕ້ານທານ innate, ຄືການສະແດງອອກ antigen situ ແລະການສົ່ງສັນຍານອັນຕະລາຍ, ແລະມີຄຸນສົມບັດດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້.[2,3]
●ສາມາດສະຫນອງການກະຕຸ້ນທີ່ສົມບູນແບບຂອງການປັບຕົວແລະພູມຕ້ານທານພາຍໃນ, ຄືການສະແດງອອກຂອງ antigen ສະຖານທີ່ແລະການສົ່ງສັນຍານອັນຕະລາຍ.
●ສາມາດກະຕຸ້ນການຕອບສະຫນອງຂອງພູມຕ້ານທານ "ສົມດູນ", ລວມທັງ humoral ແລະ cellular effectors ແລະຄວາມຈໍາຂອງພູມຕ້ານທານ.
●ສາມາດລວມ antigens ທີ່ແຕກຕ່າງກັນໂດຍບໍ່ມີການເພີ່ມຄວາມສັບສົນຂອງການສ້າງວັກຊີນ
● ການປັບປຸງພູມຄຸ້ມກັນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງສາມາດບັນລຸໄດ້ໂດຍການໃຫ້ວັກຊີນຊ້ຳແລ້ວຊ້ຳອີກ, ແລະບໍ່ມີການຕອບສະໜອງພູມຄຸ້ມກັນໜ້ອຍ ຫຼື ໜ້ອຍຕໍ່ກັບຜູ້ໃຫ້ຢາ.
● ວັກຊີນ mRNA ທີ່ຄົງທີ່ດ້ວຍຄວາມຮ້ອນສາມາດເຮັດໃຫ້ການຂົນສົ່ງ ແລະ ການເກັບຮັກສາວັກຊີນງ່າຍຂຶ້ນ
ຮູບທີ 2: ແຜນວາດແຜນວາດຂອງຢາວັກຊີນ mRNA ແລະກົນໄກການສະແດງອອກຂອງພູມຕ້ານທານຂອງມັນ [4]
ຄຸນສົມບັດຂອງວັກຊີນ mRNA
ເມື່ອປຽບທຽບກັບວັກຊີນແບບດັ້ງເດີມ, ວັກຊີນ mRNA ມີຂະບວນການຜະລິດທີ່ງ່າຍດາຍ, ຄວາມໄວຂອງການພັດທະນາໄວ, ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງມີວັດທະນະທໍາຈຸລັງ, ແລະຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕ່ໍາ.ເມື່ອປຽບທຽບກັບວັກຊີນ DNA, ວັກຊີນ mRNA ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງເຂົ້າໄປໃນນິວເຄລຍແລະບໍ່ມີຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການລວມເຂົ້າກັບ genome ເຈົ້າພາບ.ເຄິ່ງຊີວິດສາມາດປັບໄດ້ໂດຍການດັດແປງ.
ຕາຕະລາງ 1: ຂໍ້ດີ ແລະ ຂໍ້ເສຍຂອງວັກຊີນ mRNA
|
| ຂໍ້ໄດ້ປຽບ | ຂໍ້ບົກຜ່ອງ |
| ວັກຊີນ mRNA | ການຄົ້ນຄວ້າແລະການພັດທະນາຢ່າງໄວວາ, ການຜະລິດວັກຊີນໃຊ້ເວລາພຽງແຕ່ 40 ມື້ | ກະຕຸ້ນການຕອບສະຫນອງພູມຕ້ານທານທີ່ບໍ່ຈໍາເປັນ
|
| mRNA instability ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂ physiological, ງ່າຍທີ່ຈະ degrade | ຈະບໍ່ປະສົມປະສານເຂົ້າໄປໃນ genome ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການກາຍພັນທາງການປິ່ນປົວທີ່ເປັນໄປໄດ້
| |
| ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງສໍາລັບສັນຍານການທ້ອງຖິ່ນ nuclear ໃດ, ການຖອດລະຫັດ | ປະສິດທິຜົນຂອງນິວເຄລຍຄວາມປອດໄພຍັງຕ້ອງໄດ້ຮັບການກວດສອບ
|
ຮູບທີ 3: ຕາຕະລາງການຜະລິດ ແລະການກະກຽມວັກຊີນ mRNA [4]
Foregene Viral RNA Isolation ຊຸດ
RT-qPCR ງ່າຍ (ຂັ້ນຕອນດຽວ)
ປັບປຸງຍຸດທະສາດການກະກຽມຢາວັກຊີນ mRNA
ເນື່ອງຈາກຄວາມຫມັ້ນຄົງທີ່ບໍ່ດີຂອງ mRNA ຕົວຂອງມັນເອງ, ການເຊື່ອມໂຊມໄດ້ງ່າຍໂດຍ nucleases ໃນເນື້ອເຍື່ອ, ປະສິດທິພາບການເຂົ້າສູ່ເຊນຕ່ໍາ, ແລະປະສິດທິພາບການແປພາສາຕ່ໍາ, ຂໍ້ບົກພ່ອງເຫຼົ່ານີ້ຈໍາກັດການນໍາໃຊ້ຢາວັກຊີນ mRNA.ປະສິດທິພາບການແປຍັງມີບົດບາດສໍາຄັນຫຼາຍ.ຍານພາຫະນະການຈັດສົ່ງສາມາດແບ່ງອອກເປັນ vectors viral ແລະ vectors ທີ່ບໍ່ແມ່ນເຊື້ອໄວຣັສ (ລວມທັງ liposomes, ບໍ່ແມ່ນ liposomes, ໄວຣັສ, nanoparticles, ແລະອື່ນໆ).ດັ່ງນັ້ນ, ມາດຕະການປັບປຸງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງແມ່ນຈໍາເປັນ.ຕໍ່ໄປນີ້ແມ່ນຍຸດທະສາດການປັບປຸງທາງຢາສໍາລັບການກະກຽມ mRNA[2]
1 ສັງເຄາະ cap analogs ຫຼືໃຊ້ capping enzymes ເພື່ອສະຖຽນລະພາບ mRNA ແລະເພີ່ມການແປທາດໂປຼຕີນໂດຍການຜູກມັດກັບປັດໄຈການເລີ່ມຕົ້ນການແປພາສາ eukaryotic 4E (EIF4E)
2 ປັບອົງປະກອບໃນພາກພື້ນ 5′-untranslated (UTR) ແລະ 3′-UTR ເພື່ອສະຖຽນລະພາບ mRNA ແລະເພີ່ມການແປທາດໂປຼຕີນ.
3 ການເພີ່ມຫາງ Poly(A) ສາມາດເຮັດໃຫ້ mRNA ສະຖຽນລະພາບແລະເພີ່ມການແປທາດໂປຼຕີນ
4 nucleosides ດັດແກ້ເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການກະຕຸ້ນພູມຕ້ານທານພາຍໃນແລະເພີ່ມການແປພາສາ
5 ການປິ່ນປົວດ້ວຍ RNase III ແລະການຊໍາລະລ້າງທາດໂປຼຕິນໄວ chromatography (FPLC) ສາມາດຫຼຸດຜ່ອນການກະຕຸ້ນຂອງພູມຕ້ານທານແລະເພີ່ມການແປພາສາ.
6 ເພີ່ມປະສິດທິພາບລໍາດັບຫຼື codons ເພື່ອເພີ່ມການແປພາສາ
7 ການຮ່ວມມືຂອງປັດໃຈເລີ່ມຕົ້ນການແປພາສາແລະວິທີການອື່ນໆເພື່ອປ່ຽນການແປພາສາແລະພູມຕ້ານທານ
ຮູບທີ 4: ຂະບວນການຜະລິດ ແລະປະກອບ mRNA ໃນ vitro transcription (IVT) mRNA [5]
ການກະກຽມຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງ plasmid DNA
ການຊໍາລະລ້າງ DNA ຂອງ Plasmid ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນເອົາສິ່ງປົນເປື້ອນເຊັ່ນ RNA, endotoxin DNA ວົງເປີດ, ທາດໂປຼຕີນຈາກເຈົ້າພາບແລະອາຊິດນິວຄລີອິກ, ແລະປົກກະຕິແລ້ວຈະປ່ຽນ plasmid ທີ່ປະສົມປະສານເປັນ E. coli.E. coli ຜ່ານການໝັກທີ່ມີຄວາມຫນາແຫນ້ນສູງ, ຫຼັງຈາກນັ້ນການແຍກທາດແຫຼວທີ່ແຂງ, ແລະການລວບລວມຂອງ E. coli.ຫຼັງຈາກນັ້ນ, E. coli ແມ່ນຂຶ້ນກັບ lysis alkaline, ການແຍກທາດແຫຼວຂອງ centrifugal ແລະຄວາມກະຈ່າງແຈ້ງ microfiltration ຫຼັງຈາກ lysis, ultrafiltration ແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຫຼັງຈາກການຊີ້ແຈງ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນການຊໍາລະລ້າງ chromatographic.
ການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງ plasmid DNA:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[ຈ].免疫学杂志, 2016(05:446-449).
【2】Pardi N , Hogan MJ , Porter FW , et al.ວັກຊີນ mRNA — ຍຸກໃໝ່ໃນວັກຊີນວິທະຍາ[J].ທຳມະຊາດທົບທວນການຄົ້ນພົບຢາເສບຕິດ, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) ການແນະນໍາກ່ຽວກັບວັກຊີນ RNA.ໃນ: Kramps T., Elbers K. (eds) ວັກຊີນ RNA.ວິທີການໃນ Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNA ເປັນເທກໂນໂລຍີຫັນປ່ຽນສໍາລັບການພັດທະນາວັກຊີນເພື່ອຄວບຄຸມພະຍາດຕິດຕໍ່ [J].ການປິ່ນປົວດ້ວຍໂມເລກຸນ, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, , Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response, Trends in Molecular Medicine, ເຫຼັ້ມທີ 26, ສະບັບທີ 3,2020, ໜ້າ 311-323.
ເວລາປະກາດ: ສິງຫາ-05-2021
