ເຈົ້າຮູ້ຫຼາຍປານໃດ

ກ່ຽວກັບ Nການສະກັດເອົາອາຊິດ ucleic

ການເລີ່ມຕົ້ນແລະສິ້ນສຸດຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກທີ່ບໍລິສຸດ

ທຸກສິ່ງທຸກຢ່າງແມ່ນມີຄວາມຫຍຸ້ງຍາກໃນຕອນເລີ່ມຕົ້ນ, ອາຊິດ nucleic ບໍລິສຸດແມ່ນຫຼາຍທີ່ສຸດ

ການລິເລີ່ມຂອງການທົດລອງໂມເລກຸນ, ສໍາລັບການທົດລອງຕໍ່ໄປ

ຄວາມສໍາເລັດຫຼືຄວາມລົ້ມເຫລວມີຜົນກະທົບທີ່ສໍາຄັນ.

Trace/ultra-trace UV spectrophotometer ແມ່ນເປັນທີ່ຊື່ນຊອບຂອງນັກຄົ້ນຄວ້າວິທະຍາສາດຈໍານວນຫຼາຍເພາະວ່າມັນສາມາດກວດພົບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກແລະທາດໂປຼຕີນແລະເກືອ ion residues ພຽງແຕ່, ຢ່າງວ່ອງໄວແລະປະຫຍັດ.

ດັ່ງທີ່ພວກເຮົາທຸກຄົນຮູ້, A260 ຫມາຍຄວາມວ່າຄ່າ OD ການດູດຊຶມອາຊິດນິວເຄຼຍ, A280 ຫມາຍເຖິງການດູດຊຶມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງທາດໂປຼຕີນ, A230 ຫມາຍເຖິງການດູດຊຶມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງທາດໂປຼຕິນ, ດັ່ງນັ້ນ A260 ສາມາດປ່ຽນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກ, A260/280 ຫມາຍຄວາມວ່າທາດໂປຼຕີນຈາກ residue, A260/230 ຫມາຍຄວາມວ່າການຕົກຄ້າງຂອງທາດ ion ເກືອ, ແຕ່ນີ້ແມ່ນພຽງແຕ່ຜົນຂອງການຄົ້ນຄວ້າ.ທຳມະດາ” ເຊື່ອວ່າມັນສາມາດອະທິບາຍຄວາມບໍລິສຸດຂອງ DNA ແລະ RNA ກັບໃນລະດັບໃດຫນຶ່ງ.ມັນ​ບໍ່​ແມ່ນ​ມາດ​ຕະ​ຖານ​ພຽງ​ແຕ່​ສໍາ​ລັບ​ການ​ກໍາ​ນົດ​ຜົນ​ຜະ​ລິດ​ອາ​ຊິດ nucleic ແລະ​ບໍ​ລິ​ສຸດ​, ມັນ​ພຽງ​ແຕ່​ນໍາ​ໃຊ້​ເປັນ​ການ​ອ້າງ​ອີງ​, ແລະ​ມັນ​ບໍ່​ແມ່ນ "ມາດ​ຕະ​ຖານ​ຄໍາ​"​.

ຄູ່ມື Thermo Fisher ND-2000 ເນັ້ນຫນັກເຖິງຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືຂອງຜົນການທົດສອບ

ເຫດຜົນແມ່ນວ່າຜົນໄດ້ຮັບທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍໃຊ້ micro/ultramicro UV spectrophotometer ພຽງແຕ່ສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນຜົນຜະລິດແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງອາຊິດ nucleic ຈາກດ້ານຂ້າງ, ແລະມີປັດໃຈທີ່ມີອິດທິພົນຫຼາຍ (ເສັ້ນທາງ optical, ປະລິມານຕົວຢ່າງ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຕົວຢ່າງ, ຄ່າ pH, ion ອື່ນໆທີ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການວັດແທກການດູດຊຶມ, ແລະອື່ນໆ), ມູນຄ່າ OD ທີ່ວັດແທກແມ່ນບໍ່ຈໍາເປັນ.ໃນເວລາດຽວກັນ, ເນື່ອງຈາກການຂາດຄວາມສະເພາະຂອງອຸປະກອນການກໍານົດມູນຄ່າການດູດຊຶມ, DNA ສາຍດຽວ, DNA ຄູ່, RNA, dNTPs, ແລະບາງທາດໂປຼຕີນທັງຫມົດມີຈຸດສູງສຸດຂອງການດູດຊຶມຢູ່ທີ່ຄວາມຍາວຂອງຄື້ນ 260nm, ແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ກໍານົດໂດຍ A260 ຢ່າງດຽວແມ່ນບໍ່ຈໍາເປັນ DNA ຫຼື RNA ທີ່ແທ້ຈິງ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ, ແລະຄວາມຊື່ສັດແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງມັນບໍ່ສາມາດຕັດສິນໄດ້.

ດັ່ງນັ້ນວິທີການຕັດສິນຄຸນນະພາບຂອງອາຊິດ nucleic ບໍລິສຸດຂອງພວກເຮົາ?ນອກເຫນືອຈາກການໃຊ້ micro/ultramicro UV spectrophotometer ສໍາລັບການກວດຫາ, ວິທີການເຊັ່ນ: electrophoresis gel agarose ຍັງຕ້ອງການເພື່ອສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມບໍລິສຸດແລະຄວາມສົມບູນຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກ, ແລະຊີ້ໃຫ້ເຫັນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນໃນລະດັບໃດຫນຶ່ງ.ດ້ວຍວິທີນີ້, ຜົນຜະລິດອາຊິດ nucleic ແລະຄວາມບໍລິສຸດທີ່ໄດ້ຮັບຈາກຜົນການກວດພົບຂອງວິທີການຕ່າງໆແມ່ນມີຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖື.

ການປຽບທຽບແຜນວາດແບບທົດລອງ

DNA ພັນທຸ ກຳ ຂອງຈຸລັງ H1299 ໄດ້ຖືກສະກັດອອກໂດຍໃຊ້ຊຸດສະກັດ DNA ຂອງບໍລິສັດ A, ແລະການປົນເປື້ອນຂອງຄວາມບໍ່ສະອາດທີ່ເຫັນໄດ້ຊັດ, ເຮັດໃຫ້ຄຸນຄ່າ OD ສູງ.

(ຄ່າ​ວັດ​ແທກ OD ແລະ electropherogram ທີ່​ສອດ​ຄ້ອງ​ກັນ​)

ດັດຊະນີການປະເມີນຜົນ

ມີ "ມາດຕະຖານທອງ" ສໍາລັບຜົນຜະລິດອາຊິດນິວຄລີອິກແລະການທົດສອບຄຸນນະພາບບໍ?

ເທົ່າທີ່ພວກເຮົາຮູ້, ບໍ່ມີວິທີການງ່າຍດາຍ, ໄວແລະລາຄາຖືກ.ບໍ່ວ່າຈະເປັນ spectrophotometer, gel electrophoresis, ຫຼື mass spectrometry, ພວກມັນທັງຫມົດສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແລະຄວາມບໍລິສຸດຂອງອາຊິດ nucleic ໃນການແກ້ໄຂຈາກລັກສະນະທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ແລະພວກເຂົາຕ້ອງໄດ້ຮັບການຕັດສິນໂດຍການອ້າງອີງເຊິ່ງກັນແລະກັນ.

ດັດຊະນີການປະເມີນຜົນທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນສະເຫມີໄປຄໍາຮ້ອງສະຫມັກການທົດລອງຕິດຕາມ.ມັນບໍ່ມີຜົນຕໍ່ປະສິດທິພາບຂອງ reverse transcription ແລະ PCR amplification.ການໄດ້ຮັບຜະລິດຕະພັນຂະຫຍາຍພັນທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະຄ່າ Ct, ແລະການໄດ້ຮັບລໍາດັບທີ່ສົມບູນໂດຍການຈັດລໍາດັບແມ່ນການສະກັດເອົາອາຊິດ nucleic ສົບຜົນສໍາເລັດ.

ເພື່ອສະຫຼຸບ, ທັດສະນະຂອງທິດສະດີພຽງແຕ່ອັດຕາສ່ວນຄວນຈະຖືກທ້າທາຍໂດຍທັດສະນະຂອງ "ການນໍາໃຊ້ຜົນການທົດລອງທາງລຸ່ມທີ່ດີເປັນຕົວກໍານົດການສະກັດເອົາທີ່ດີ"!

ຊຸດສະກັດຈາກ Foregene DNA RNA ແນະນໍາເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຄວາມບໍລິສຸດຂອງ DNA/RNA ສູງ:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/