Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Reagent(zebrafish)
ລາຍລະອຽດຊຸດ:
ການນໍາໃຊ້ໂດຍກົງຂອງ zebrafish lysate ເປັນແມ່ແບບສໍາລັບການຂະຫຍາຍ PCR, ບໍ່ມີການສະກັດເອົາ DNA ແຍກຕ່າງຫາກ, ໄວແລະຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ.ເພີ່ມລະບົບຕ້ານມົນລະພິດຂອງ UNG ເພື່ອກໍາຈັດຜົນບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ.
◮ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງໃຊ້ເວລາໃນການຊໍາລະລ້າງ DNA ແລະລາຄາແພງ.
◮ຄວາມຕ້ອງການຕົວຢ່າງແມ່ນຂະຫນາດນ້ອຍ, ພຽງແຕ່ເອົາເມັດດຽວ.
◮ບໍ່ມີການປິ່ນປົວພິເສດເຊັ່ນ: ການຂັດແລະການປວດ, ແລະການດໍາເນີນງານແມ່ນງ່າຍດາຍ.
◮ລະບົບ PCR ທີ່ຖືກປັບປຸງໃຫ້ດີທີ່ສຸດເຮັດໃຫ້ PCR ມີຄວາມສະເພາະທີ່ສູງຂຶ້ນແລະຄວາມທົນທານຕໍ່ຕົວຍັບຍັ້ງປະຕິກິລິຢາ PCR.
ລາຍລະອຽດ
ຊຸດນີ້ໃຊ້ລະບົບ lysis buffer ທີ່ເປັນເອກະລັກເພື່ອປ່ອຍ DNA genomic ຈາກ zebrafish ແລະແພຈຸລັງປານ້ໍາຈືດອື່ນໆ, ຫາງຫຼືໄຂ່ປາຕົວຢ່າງສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR, ດັ່ງນັ້ນມັນເຫມາະສົມໂດຍສະເພາະສໍາລັບການທົດສອບພັນທຸກໍາຂະຫນາດໃຫຍ່.ຂະບວນການປ່ອຍ DNA genomic ຈາກ lysis buffer ແມ່ນສໍາເລັດພາຍໃນ 10-30 ນາທີຢູ່ທີ່ 65 ° C.ບໍ່ມີຂະບວນການອື່ນໆເຊັ່ນ: ການກໍາຈັດທາດໂປຼຕີນແລະ RNA, ແລະ DNA ຮ່ອງຮອຍທີ່ປ່ອຍອອກມາສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເປັນແມ່ແບບສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR.
2 × PCR EasyTM Mix (UNG) ໃຊ້ dUTP ແທນ dTTP ບົນພື້ນຖານຂອງ 2 × PCR EasyTM Mix, ແລະເພີ່ມ enzyme UNG (Uracil-N-glycosylase) ທີ່ສາມາດທໍາລາຍແມ່ແບບທີ່ມີ dUTP ໃນເວລາດຽວກັນ.ກ່ອນທີ່ຈະປະຕິກິລິຍາ PCR, ເອນໄຊ UNG ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອທໍາລາຍຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ມີ uracil.ເອນໄຊ UNG ຈະບໍ່ມີຜົນກະທົບໃດໆກ່ຽວກັບແມ່ແບບທີ່ບໍ່ມີ uracil, ດັ່ງນັ້ນການຮັບປະກັນຄວາມສະເພາະແລະຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການຂະຫຍາຍແລະປ້ອງກັນຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງການທົດສອບທາງພັນທຸກໍາຂະຫນາດໃຫຍ່.ການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ເກີດຂຶ້ນ.
D-Taq DNA polymerase ແມ່ນ DNA polymerase ພິເສດທີ່ພັດທະນາໂດຍ Foregene ສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR ໂດຍກົງ.D-Taq DNA polymerase ມີຄວາມທົນທານຕໍ່ຕົວຍັບຍັ້ງປະຕິກິລິຢາ PCR ຫຼາຍຊະນິດ, ແລະສາມາດຂະຫຍາຍຈໍານວນ TRACE ຂອງ DNA ໃນລະບົບຕິກິຣິຍາທີ່ສັບສົນຕ່າງໆຢ່າງມີປະສິດທິພາບ, ແລະຄວາມໄວການຂະຫຍາຍສາມາດບັນລຸ 2Kb / ນາທີ, ເຊິ່ງເຫມາະສົມໂດຍສະເພາະສໍາລັບການຕິກິຣິຍາ PCR ໂດຍກົງ.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
ອົງປະກອບຊຸດ
| ສ່ວນ I | Buffer FP |
| Foregene Protease | |
| 6× DNA Loading Buffer | |
| ພາກທີ II | 2 × PCR ງ່າຍTMປະສົມ(UNG) |
| ຄໍາແນະນໍາ | |
ຄຸນນະສົມບັດແລະຂໍ້ດີ
■ ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງໃຊ້ການຊໍາລະລ້າງ DNA ທີ່ໃຊ້ເວລາຫຼາຍ ແລະລາຄາແພງ.
■ ຄວາມຕ້ອງການຕົວຢ່າງມີຂະຫນາດນ້ອຍ, ຫນ້ອຍເຖິງ 1mg ຫາງປາ fin ຫຼື 10 ໄຂ່ປາສາມາດທົດສອບໄດ້.
■ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງມີການປິ່ນປົວພິເສດເຊັ່ນ: ການຂັດແລະການຂັດ, ແລະການດໍາເນີນງານແມ່ນງ່າຍດາຍ.
■ລະບົບ PCR ຕ້ານມົນລະພິດ 2 × PCR EasyTM Mix (UNG), ເຊິ່ງສາມາດກໍາຈັດມົນລະພິດທີ່ເກີດຈາກຜະລິດຕະພັນ PCR ຢ່າງມີປະສິດທິພາບແລະຮັບປະກັນຄວາມສະເພາະແລະຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການຂະຫຍາຍ.
■ ລະບົບ PCR ທີ່ດີທີ່ສຸດເຮັດໃຫ້ PCR ມີຄວາມສະເພາະທີ່ສູງຂຶ້ນ ແລະມີຄວາມທົນທານຕໍ່ກັບປະຕິກິລິຢາຍັບຍັ້ງ PCR.
ຕົວກໍານົດການຊຸດ
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ: ປາ Zebra ແລະປານ້ໍາຈືດອື່ນໆ.
DNA ປ່ອຍອອກມາຈາກຕົວຢ່າງ lysis: ໃຊ້ເປັນແມ່ແບບ PCR ເທົ່ານັ້ນ.
ຊຸດສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອຈຸດປະສົງດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້: ການກໍານົດຕົວຂອງ transgenosis, genotyping ສັດ, ແລະອື່ນໆ.
ຂະບວນການເຮັດວຽກ
ການເກັບຮັກສາແລະອາຍຸການເກັບຮັກສາ
ສ່ວນ I ຂອງຊຸດນີ້ຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ 2-8 ℃.
Buffer FP reagent ສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ໄດ້ 12 ເດືອນພາຍໃຕ້ສະພາບແຫ້ງແລ້ງ;ມັນສາມາດໄດ້ຮັບການເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 2-8 ℃ສໍາລັບການເກັບຮັກສາທີ່ຍາວກວ່າ.
v Reagent Foregene Protease ມີສູດທີ່ເປັນເອກະລັກ.ເພື່ອຮັບປະກັນກິດຈະກໍາແລະຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງມັນ, ກະລຸນາເກັບຮັກສາມັນຢູ່ທີ່ 4 ℃ສໍາລັບ 12 ເດືອນ.
vReagent 6×DNA Loading Buffer ສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 4℃ ຫຼື -20℃ ເປັນເວລາດົນນານ.
ພາກທີ II ຂອງຊຸດນີ້ຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -20 ℃.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix(UNG), ຖ້າຖືກນໍາໃຊ້ເລື້ອຍໆ, ມັນຍັງສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 4 ℃ສໍາລັບການເກັບຮັກສາໄລຍະສັ້ນ (ໃຊ້ໄດ້ພາຍໃນ 10 ມື້).
