ເວລາຈິງ PCR Easyᵀᴹ-Taqman
ລາຍລະອຽດຊຸດ
2X ທີ່ແທ້ຈິງ PCR ງ່າຍTMMix-Taqman ສະໜອງໃຫ້ໂດຍ Real Time PCR EasyTM-Taqman kit ແມ່ນລະບົບ premix ໃຫມ່ທີ່ນໍາໃຊ້ probes fluorescent ສະເພາະສໍາລັບການຕິກິລິຍາການຂະຫຍາຍ PCR ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງ, ເຊິ່ງສາມາດປັບປຸງຄວາມສະເພາະຂອງຜະລິດຕະພັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍແລະຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງຕິກິຣິຍາ.ROX ໄດ້ຖືກສະຫນອງໃຫ້ເປັນສີຍ້ອມຜ້າຄວບຄຸມພາຍໃນ.
2X ທີ່ແທ້ຈິງ PCR ງ່າຍTMMix-Taqman ປະກອບດ້ວຍ Taq DNA Polymerase ທີ່ເປັນຈຸດເລີ່ມຕົ້ນອັນຮ້ອນຂອງ Foregene.ເມື່ອປຽບທຽບກັບ enzymes Taq ທໍາມະດາ, ມັນມີຄວາມໄດ້ປຽບຂອງປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍສູງ, ຄວາມສາມາດຂະຫຍາຍໃຫຍ່ຂື້ນສະເພາະທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະອັດຕາການບໍ່ກົງກັນຕ່ໍາ.ມັນສາມາດຫຼຸດຜ່ອນການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະແລະປັບປຸງຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງ PCR.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
ເວລາຈິງ PCR ງ່າຍTM-Taqman | ||||
ອົງປະກອບຊຸດ (ລະບົບ 20μl) | QP-01021 | QP-01022 | QP-01023 | QP-01024 |
200T | 500T | 1000T | 2000T | |
2×PCR ທີ່ແທ້ຈິງງ່າຍTMປະສົມ-Taqman | 1 ມລ ×2 | 1.7 ml ×3 | 1.7 ml ×6 | 1.7 ml ×12 |
20×ROX ອ້າງອິງສີຍ້ອມ | 200 ມລ | 0.5ml | 1 ມລ | 1 ມລ × 2 |
DNase-Free ddH2O | 1.7 ມລ | 1.7 ml ×2 | 10 ມລ | 20 ມລ |
Iການສອນ | 1 | 1 | 1 | 1 |
ຄຸນນະສົມບັດແລະຂໍ້ດີ
■ ງ່າຍດາຍ—2X PCR Mix ເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຜິດພາດໃນການທົດລອງ ແລະເວລາປະຕິບັດງານ
■ ສະເພາະ - buffer ທີ່ດີທີ່ສຸດແລະ enzyme Taq ເລີ່ມຕົ້ນຮ້ອນສາມາດປ້ອງກັນການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະແລະການສ້າງ primer dimer
■ ຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ—ສາມາດກວດຫາສຳເນົາຂອງແມ່ແບບຕໍ່າໄດ້
■ ຄວາມຄ່ອງຕົວທີ່ດີ—ເຂົ້າກັນໄດ້ກັບເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານໃນເວລາຈິງທີ່ສຸດ
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຊຸດ
ການວິເຄາະ qPCR
ກະແສວຽກ
ຮູບພາບ
ການເກັບຮັກສາແລະອາຍຸການເກັບຮັກສາ
ຊຸດນີ້ຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ຫ່າງຈາກແສງສະຫວ່າງແລະຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -20 ℃.ຖ້າໃຊ້ເລື້ອຍໆ, ມັນຍັງສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ 4 ℃ໃນໄລຍະເວລາສັ້ນໆ (10 ມື້).
ບໍ່ມີສັນຍານການຂະຫຍາຍ
1.The Taq DNA Polymerase ໃນຊຸດສູນເສຍການເຄື່ອນໄຫວເນື່ອງຈາກການເກັບຮັກສາບໍ່ຖືກຕ້ອງ ຫຼືໝົດອາຍຸຂອງຊຸດ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາຂອງຊຸດ;ເພີ່ມປະລິມານທີ່ເໝາະສົມຂອງ Taq DNA Polymerase ໃຫ້ກັບລະບົບ PCR ຫຼືຊື້ຊຸດ PCR ແບບສົດໆໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ.
2.ມີຫຼາຍຕົວຍັບຍັ້ງຂອງ Taq DNA Polymerase ໃນແມ່ແບບ DNA.
ຄໍາແນະນໍາ: Repurify ແມ່ແບບຫຼືຫຼຸດຜ່ອນຈໍານວນຂອງແມ່ແບບທີ່ນໍາໃຊ້.
3.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄຳແນະນຳ: ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ຂອງ 2× Real PCR Mix ທີ່ພວກເຮົາໃຫ້ແມ່ນ 3.5mM.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສໍາລັບບາງ primers ແລະແມ່ແບບພິເສດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+ ອາດຈະສູງກວ່າ.ດັ່ງນັ້ນ, ທ່ານສາມາດເພີ່ມ MgCl2 ໂດຍກົງເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+.ແນະນໍາໃຫ້ເພີ່ມ Mg2+ 0.5mM ໃນແຕ່ລະຄັ້ງສໍາລັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
4.The PCR ເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ, ແລະລໍາດັບ primer ຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງລໍາດັບ primer ແລະ primer ບໍ່ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ;ຖ້າສັນຍານການຂະຫຍາຍບໍ່ດີ, ພະຍາຍາມຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມ annealing ແລະປັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ທີ່ເຫມາະສົມ.
5.ປະລິມານຂອງແມ່ແບບແມ່ນຫນ້ອຍເກີນໄປຫຼືຫຼາຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ປະຕິບັດການເຈືອຈາງແບບເສັ້ນເສັ້ນຂອງແມ່ແບບ, ແລະເລືອກຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງແມ່ແບບທີ່ມີຜົນກະທົບ PCR ທີ່ດີທີ່ສຸດສໍາລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
NTC ມີມູນຄ່າ fluorescence ສູງເກີນໄປ
1.Reagent ການປົນເປື້ອນທີ່ເກີດຈາກການດໍາເນີນການ.
ຄໍາແນະນໍາ: ທົດແທນດ້ວຍທາດປະສົມໃຫມ່ສໍາລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
2.Contamination ເກີດຂຶ້ນໃນລະຫວ່າງການກະກຽມຂອງລະບົບຕິກິຣິຍາ PCR.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຊ້ມາດຕະການປ້ອງກັນທີ່ຈໍາເປັນໃນເວລາປະຕິບັດງານ, ເຊັ່ນ: ການໃສ່ຖົງມືຢາງ, ໃຊ້ປາຍທໍ່ທີ່ມີການກັ່ນຕອງ, ແລະອື່ນໆ.
3.The primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ, ແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງ primers ຈະເຮັດໃຫ້ການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ແມ່ນສະເພາະ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເຊື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນພວກມັນດ້ວຍ primers ໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
primer dimer ຫຼືການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະ
1.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄຳແນະນຳ: ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ Mg2+ ຂອງ 2× Real PCR EasyTM Mix ທີ່ພວກເຮົາໃຫ້ແມ່ນ 3.5 mM.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສໍາລັບບາງ primers ແລະແມ່ແບບພິເສດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+ ອາດຈະສູງກວ່າ.ດັ່ງນັ້ນ, ທ່ານສາມາດເພີ່ມ MgCl2 ໂດຍກົງເພື່ອເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ Mg2+.ແນະນໍາໃຫ້ເພີ່ມ Mg2+ 0.5mM ໃນແຕ່ລະຄັ້ງສໍາລັບການເພີ່ມປະສິດທິພາບ.
2.The PCR annealing ອຸນຫະພູມຕ່ໍາເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ເພີ່ມອຸນຫະພູມ PCR annealing ໂດຍ 1 ℃ຫຼື 2 ℃ໃນແຕ່ລະຄັ້ງ.
3.ຜະລິດຕະພັນ PCR ແມ່ນຍາວເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຄວາມຍາວຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ແທ້ຈິງຄວນຈະຢູ່ລະຫວ່າງ 100-150bp, ບໍ່ເກີນ 500bp.
4.The primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ, ແລະການເຊື່ອມໂຊມຂອງ primers ຈະນໍາໄປສູ່ຮູບລັກສະນະຂອງ amplification ສະເພາະ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເຊື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນພວກມັນດ້ວຍ primers ໃໝ່ສຳລັບການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
5.ລະບົບ PCR ແມ່ນບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຫຼືລະບົບມີຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR ຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການກວດສອບຫຼຸດລົງ.ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະໃຊ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທີ່ແນະນໍາໂດຍເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານເພື່ອດໍາເນີນການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.
ການເຮັດເລື້ມຄືນທີ່ບໍ່ດີຂອງມູນຄ່າປະລິມານ
1. ເຄື່ອງມືເຮັດວຽກຜິດປົກກະຕິ.
ຄໍາແນະນໍາ: ອາດຈະມີຄວາມຜິດພາດລະຫວ່າງແຕ່ລະຂຸມ PCR ຂອງເຄື່ອງມື, ສົ່ງຜົນໃຫ້ເກີດໃຫມ່ທີ່ບໍ່ດີໃນລະຫວ່າງການຈັດການຫຼືການກວດພົບອຸນຫະພູມ.ກະລຸນາກວດເບິ່ງຕາມຄໍາແນະນໍາຂອງເຄື່ອງມືທີ່ສອດຄ້ອງກັນ.
2.ຄວາມບໍລິສຸດຕົວຢ່າງບໍ່ດີ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ສະອາດຈະນໍາໄປສູ່ການແຜ່ພັນທີ່ບໍ່ດີຂອງການທົດລອງ, ເຊິ່ງລວມທັງຄວາມບໍລິສຸດຂອງແມ່ແບບແລະ primers.ມັນເປັນສິ່ງທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ຈະຊໍາລະແມ່ແບບຄືນໃຫມ່, ແລະ primers ໄດ້ຖືກເຮັດຄວາມສະອາດທີ່ດີທີ່ສຸດໂດຍ SDS-PAGE.
3.The PCR ການກະກຽມລະບົບແລະເວລາເກັບຮັກສາແມ່ນຍາວເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຊ້ລະບົບ PCR ໃນເວລາຈິງສໍາລັບການທົດລອງ PCR ທັນທີຫຼັງຈາກການກະກຽມ, ແລະຢ່າປ່ອຍໃຫ້ມັນຄ້າງໄວ້ດົນເກີນໄປ.
4.The PCR ເງື່ອນໄຂການຂະຫຍາຍແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ, ແລະລໍາດັບ primer ຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນແມ່ນບໍ່ເຫມາະສົມ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຢືນຢັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງລໍາດັບ primer ແລະ primer ບໍ່ໄດ້ຖືກທໍາລາຍ;ຖ້າສັນຍານການຂະຫຍາຍບໍ່ດີ, ພະຍາຍາມຫຼຸດລົງອຸນຫະພູມ annealing ແລະປັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ primer ທີ່ເຫມາະສົມ.
5.ລະບົບ PCR ແມ່ນບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຫຼືລະບົບມີຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປ.
ຄໍາແນະນໍາ: ລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR ຂະຫນາດນ້ອຍເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການກວດສອບຫຼຸດລົງ.ມັນດີທີ່ສຸດທີ່ຈະໃຊ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທີ່ແນະນໍາໂດຍເຄື່ອງມື PCR ປະລິມານເພື່ອດໍາເນີນການທົດລອງ PCR ໃນເວລາຈິງ.