• ເຟສບຸກ
  • ລິ້ງຄ໌
  • youtube

ສ້າງຕັ້ງ PCR ທົດລອງ SOP ເພື່ອມາດຕະຖານພຶດຕິກໍາຂອງພະນັກງານທົດລອງ.

4.1

ຜູ້ທົດລອງປະຕິບັດຕາມຂັ້ນຕອນການປະຕິບັດຢ່າງເຂັ້ມງວດ, ແລະຫຼຸດຜ່ອນມົນລະພິດ PCR ທີ່ອາດຈະເກີດຈາກປັດໃຈຂອງມະນຸດຫຼືປ້ອງກັນການເກີດຂອງມົນລະພິດ.ນອກຈາກນັ້ນ, ຜູ້ທົດລອງຄວນຈະມີຄວາມຮູ້ແລະທັກສະດ້ານວິຊາຊີບທີ່ສອດຄ້ອງກັນ, ລວມທັງຄວາມຊໍານານໃນການດໍາເນີນງານອຸປະກອນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ, ຊີ້ແຈງຂະບວນການເຮັດວຽກທັງຫມົດ, ຊໍານິຊໍານານໃນການປິ່ນປົວການປົນເປື້ອນແລະວິທີການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງຫ້ອງທົດລອງ, ແລະສາມາດຕີຄວາມຫມາຍຜົນການທົດສອບຢ່າງຖືກຕ້ອງ.

ສ້າງຕັ້ງຫ້ອງທົດລອງ PCR ມາດຕະຖານ.

4.2

ຫ້ອງທົດລອງ PCR ແບ່ງອອກເປັນສີ່ພື້ນທີ່ໃນຫຼັກການ, ຄືພື້ນທີ່ກະກຽມ reagent, ພື້ນທີ່ການປຸງແຕ່ງຕົວຢ່າງ, ພື້ນທີ່ຂະຫຍາຍ, ແລະພື້ນທີ່ການວິເຄາະຜະລິດຕະພັນການຂະຫຍາຍ.ສອງພື້ນທີ່ທໍາອິດແມ່ນເຂດການຂະຫຍາຍເບື້ອງຕົ້ນ, ແລະສອງເຂດສຸດທ້າຍແມ່ນເຂດຫລັງການຂະຫຍາຍ.ເຂດກ່ອນຂະຫຍາຍ ແລະເຂດຫຼັງການຂະຫຍາຍຄວນແຍກອອກຢ່າງເຂັ້ມງວດ.ວັດສະດຸທົດລອງ, reagents, ເຈ້ຍບັນທຶກ, pens, ວັດສະດຸທໍາຄວາມສະອາດ, ແລະອື່ນໆ, ພຽງແຕ່ສາມາດໄຫຼຈາກພື້ນທີ່ pre-amplification ກັບພື້ນທີ່ post-amplification, ນັ້ນແມ່ນ, ຈາກພື້ນທີ່ກະກຽມ reagent →ພື້ນທີ່ປະມວນຜົນຕົວຢ່າງ → amplification → amplification ພື້ນທີ່ການວິເຄາະຜະລິດຕະພັນ, ແລະບໍ່ຕ້ອງໄຫຼກັບຄືນໄປບ່ອນ.ການໄຫຼຂອງອາກາດໃນຫ້ອງທົດລອງຄວນໄຫຼຈາກພື້ນທີ່ກ່ອນການຂະຫຍາຍໄປສູ່ພື້ນທີ່ຫຼັງການຂະຫຍາຍ, ແລະບໍ່ໄຫຼກັບຄືນ.ການອອກແບບຫ້ອງທົດລອງ PCR ທີ່ເຫມາະສົມແມ່ນສະແດງໃຫ້ເຫັນຂ້າງລຸ່ມນີ້:

4.3

ຮູບ A: ຮູບແບບການຕິດຕັ້ງຫ້ອງທົດລອງ PCR ທີ່ເຫມາະສົມກັບຄວາມກົດດັນທາງລົບຢູ່ໃນຫ້ອງ buffer

4.4

ຮູບ B: ຮູບແບບການຕິດຕັ້ງຫ້ອງທົດລອງ PCR ທີ່ເຫມາະສົມກັບຄວາມກົດດັນໃນທາງບວກຢູ່ໃນຫ້ອງ buffer

ແຜນວາດການຕິດຕັ້ງຫ້ອງທົດລອງ PCR ທີ່ຢູ່ໃນຮູບ A ແລະຮູບ B ຄວນຈະເປັນຮູບແບບການຕັ້ງຄ່າທີ່ເຫມາະສົມກວ່າ, ແລະຫ້ອງທົດລອງທີ່ມີເງື່ອນໄຂສາມາດອ້າງອີງເຖິງຮູບແບບນີ້ສໍາລັບການອອກແບບ.ສໍາລັບຫ້ອງທົດລອງປະຊຸມສະໄຫມ, ແນະນໍາວ່າພື້ນທີ່ຂະຫຍາຍ PCR ແລະພື້ນທີ່ການວິເຄາະຜະລິດຕະພັນສາມາດແຍກອອກໄດ້, ແລະການເປີດຝາຄວນຖືກຫຼຸດລົງຫຼາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້ໃນພື້ນທີ່ກະກຽມຕົວຢ່າງແລະພື້ນທີ່ຂະຫຍາຍ PCR.ຈືຂໍ້ມູນການ: ຜະລິດຕະພັນແລະອຸປະກອນທົດລອງໃນພື້ນທີ່ການວິເຄາະຜະລິດຕະພັນແມ່ນຖືກຫ້າມຢ່າງເຂັ້ມງວດຈາກການຖືກນໍາໄປຫາພື້ນທີ່ກະກຽມຕົວຢ່າງແລະພື້ນທີ່ຂະຫຍາຍ PCR.

4.5

ຖ້າຫ້ອງທົດລອງພຽງແຕ່ປະຕິບັດການກວດຫາ PCR ແລະການກໍານົດ, ມັນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ PCR ປະລິມານ fluorescent ແທນທີ່ຈະເປັນ PCR ທໍາມະດາ.

ຜົນໄດ້ຮັບການກວດສອບ PCR ປະລິມານ fluorescence ສາມາດເກັບກໍາແລະວິເຄາະໂດຍສັນຍານ fluorescence, ດັ່ງນັ້ນບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງເປີດຝາສໍາລັບ electrophoresis ຫຼັງຈາກຕິກິຣິຍາ, ເຊິ່ງຫຼີກເວັ້ນການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ເກີດຈາກການຮົ່ວໄຫລຂອງຜະລິດຕະພັນຕິກິຣິຍາທີ່ຈະປະກອບເປັນ aerosols.ຖ້າທ່ານເພີ່ມຈໍານວນການເປີດຝາໃນລະຫວ່າງຂັ້ນຕອນການໂຫຼດຂອງ gel electrophoresis, ການປົນເປື້ອນຂອງ aerosol ມີແນວໂນ້ມທີ່ຈະເກີດຂຶ້ນ.ມັນໄດ້ຖືກແນະນໍາໃຫ້ສົ່ງເສີມການນໍາໃຊ້ PCR ປະລິມານແລະຄ່ອຍໆປ່ຽນແທນ PCR ທີ່ມີຄຸນນະພາບ.

ລະບົບການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ UNG ຕ້ານ PCR ຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການຕິກິຣິຍາ PCR.

ລະບົບໃຊ້ dUTP ແທນ dTTP.ຫຼັງຈາກປະຕິກິລິຍາ PCR, ຜະລິດຕະພັນ PCR ທັງຫມົດ (ຊິ້ນ DNA) ຖືກລວມເຂົ້າກັບ dUTP;ໃນຮອບຕໍ່ໄປຂອງປະຕິກິລິຍາ PCR, ເອນໄຊ UNG ທີ່ເພີ່ມເຂົ້າໃນລະບົບແມ່ນ incubated ຢູ່ທີ່ 37 ° C ສໍາລັບ 5 ນາທີກ່ອນ PCR, ເຊິ່ງໂດຍສະເພາະສາມາດທໍາລາຍຊິ້ນ DNA ທັງຫມົດທີ່ປະກອບດ້ວຍ dUTP, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນປະຕິບັດປະຕິກິລິຍາ PCR.ນີ້ສາມາດກໍາຈັດການປົນເປື້ອນຂອງ aerosol ທີ່ເກີດຈາກຜະລິດຕະພັນ PCR ຢ່າງສົມບູນ.ຜົນກະທົບແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບຂ້າງລຸ່ມນີ້:

4.6

ຫມາຍເຫດ: ສໍາລັບຊຸດ PCR ໂດຍກົງ, ທ່ານສາມາດເລືອກຜະລິດຕະພັນຊຸດຂອງລະບົບການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນຕ້ານ PCR ຂອງ Foregene.ແນະນຳ

ສໍາລັບຫ້ອງທົດລອງທີ່ດໍາເນີນການທົດສອບ genotyping ຂະຫນາດໃຫຍ່, ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ລະບົບການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ UNG anti-PCR ສໍາລັບການທົດສອບ reagents ນອກເຫນືອໄປຈາກການກໍ່ສ້າງຫ້ອງທົດລອງທີ່ສົມເຫດສົມຜົນ.

ຄໍາເຕືອນ: ການໃຊ້ລະບົບນີ້ບໍ່ສາມາດເອົາການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ເກີດແລ້ວ.ດັ່ງນັ້ນ, ລະບົບ UNG ຄວນຖືກນໍາໃຊ້ໃນຕອນເລີ່ມຕົ້ນຂອງການທົດສອບທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ, ແລະລະບົບ UNG ຄວນຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການຂະຫຍາຍ PCR, ເພື່ອປ້ອງກັນການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງໃນທາງບວກ.

ມັນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ລະບົບ Direct PCR-UNG ຂອງ Foregene ເມື່ອດໍາເນີນການທົດສອບຂະຫນາດໃຫຍ່, ເຊັ່ນ:

Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;

ຊຸດ PCR ໂດຍກົງຂອງເມັດພືດ - UNG;

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

ຊຸດຊຸດນີ້ຈາກ Foregeneບໍ່ພຽງແຕ່ສາມາດດໍາເນີນການກວດຫາ PCR ໄດ້ໄວແລະໃນຂະຫນາດໃຫຍ່, ແຕ່ຍັງປະສິດທິພາບປ້ອງກັນແລະຄວບຄຸມການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR.


ເວລາປະກາດ: 19-03-2021