1​: ທົດ​ແທນ​ການ​ອຸ​ປະ​ກອນ​ການ​ທົດ​ລອງ​ໃນ​ເວ​ລາ​

ຕັ້ງຄ່າການຄວບຄຸມທາງລົບ (NTC) ແລະເຮັດຊ້ໍາອີກຫຼາຍຄັ້ງ.ເມື່ອພົບວ່າມີການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ຢູ່ໃນຫ້ອງທົດລອງ, ໃຫ້ປ່ຽນອຸປະກອນທົດລອງທັງຫມົດໃຫ້ທັນເວລາ.ເຊັ່ນ: ເຈືອຈາງຄືນໃຫມ່ແລະກະກຽມ primers, re-sterilize the pipette, re-sterilize the pipette, EP tube, ddH2O, ແລະອື່ນໆ, ທົດແທນດ້ວຍ pipette ໃຫມ່, ແລະຊົ່ວຄາວກູ້ຢືມຫ້ອງທົດລອງອື່ນໆເພື່ອປະຕິບັດການທົດລອງ PCR.ຫ້ອງທົດລອງທີ່ມີການປົນເປື້ອນຈະຖືກລະບາຍອາກາດແລະ irradiated ດ້ວຍຮັງສີ ultraviolet ຈົນກ່ວາການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ໄດ້ຖືກລົບລ້າງກ່ອນທີ່ຈະດໍາເນີນການທົດລອງ.

2: ຂະຫຍາຍເວລາການຮັບແສງ UV

ມັນເປັນມູນຄ່າທີ່ສັງເກດວ່າເພື່ອກໍາຈັດການປົນເປື້ອນຂອງ DNA, ຮັງສີ ultraviolet ປົກກະຕິຄວນໄດ້ຮັບການຂະຫຍາຍອອກ 2 ຊົ່ວໂມງກ່ວາປົກກະຕິ.ເຖິງແມ່ນວ່າ, ຜົນກະທົບຂອງການ irradiation UV ໃນການກໍາຈັດ fragments ຂະຫນາດນ້ອຍ (ຕ່ໍາກວ່າ 200bp) ຂອງການປົນເປື້ອນ DNA ແມ່ນຍັງບໍ່ດີ.

ຄວາມຍາວຄື້ນ ultraviolet (nm) ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນ 254/300nm, ແລະມັນພຽງພໍທີ່ຈະ irradiate ສໍາລັບ 30 ນາທີ.ມັນຄວນຈະສັງເກດວ່າໃນເວລາທີ່ເລືອກ UV ເພື່ອກໍາຈັດການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ຕົກຄ້າງ, ຄວາມຍາວຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ແລະການແຈກຢາຍພື້ນຖານໃນລໍາດັບຜະລິດຕະພັນຄວນໄດ້ຮັບການພິຈາລະນາ.ການ irradiation UV ມີຜົນພຽງແຕ່ສໍາລັບ fragments ຍາວຂ້າງເທິງ 500 bp, ແລະມີຜົນກະທົບພຽງເລັກນ້ອຍກ່ຽວກັບ fragments ສັ້ນ.

ໃນລະຫວ່າງການ irradiation UV, ຖານ pyrimidine ໃນຜະລິດຕະພັນ PCR ຈະປະກອບເປັນ dimers.dimers ເຫຼົ່ານີ້ສາມາດຢຸດການຂະຫຍາຍໄດ້, ແຕ່ບໍ່ແມ່ນ pyrimidines ທັງຫມົດໃນລະບົບຕ່ອງໂສ້ DNA ສາມາດສ້າງ dimers, ແລະການ irradiation UV ຍັງສາມາດທໍາລາຍ dimers ໄດ້..ລະດັບຂອງການສ້າງ dimer ແມ່ນຂຶ້ນກັບຄວາມຍາວຂອງຄື້ນ UV, ປະເພດຂອງ pyrimidine dimer ແລະລໍາດັບຂອງ nucleotides ທີ່ຕິດກັບສະຖານທີ່ dimer.ດັ່ງນັ້ນ, ຖ້າຊິ້ນສ່ວນຂະຫຍາຍ PCR ມີຂະຫນາດນ້ອຍ, ມັນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ລະບົບການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ UNG.

3: ເຄື່ອງຂູດມົນລະພິດ DNA ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປ

Aerosols ແມ່ນຜະລິດໄດ້ງ່າຍເມື່ອທໍ່ທໍ່ຖືກເພີ່ມ, ເຊິ່ງຍາກທີ່ຈະຫຼີກເວັ້ນ, ແລະມັນຈະຕົກລົງຢ່າງໄວວາ.ດັ່ງນັ້ນ, ມັນແນ່ນອນວ່າມັນເປັນທາງເລືອກທີ່ດີທີ່ຈະໃຊ້ເຄື່ອງຂູດມົນລະພິດ DNA ພິເສດເລື້ອຍໆເພື່ອປ້ອງກັນການແຜ່ກະຈາຍຂອງມົນລະພິດ DNA.

4: ໃຊ້ລະບົບຕ້ານມົນລະພິດ UNG

ຫຼັງຈາກການປົນເປື້ອນຜະລິດຕະພັນ PCR ໄດ້ຖືກໂຍກຍ້າຍ, ຫ້ອງທົດລອງສາມາດນໍາໃຊ້ລະບົບການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ຂອງ UNG ເພື່ອປ້ອງກັນການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR.ຢູ່ໃນຫ້ອງທົດລອງທົ່ວໄປ, ທ່ານສາມາດປະຕິບັດການແບ່ງສ່ວນທົດລອງແບບງ່າຍດາຍ, ແຍກພື້ນທີ່ຜະລິດຕະພັນ PCR ຢ່າງເຂັ້ມງວດຈາກພື້ນທີ່ອື່ນໆ, ສ້າງກົດລະບຽບແລະກົດລະບຽບຂອງຫ້ອງທົດລອງບາງຢ່າງ, ແລະດໍາເນີນການຝຶກອົບຮົມທີ່ກ່ຽວຂ້ອງເພື່ອປ້ອງກັນການປະກົດຕົວຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR.

ຄໍາແນະນໍາ: ການສ້າງຫ້ອງທົດລອງ PCR ທີ່ສົມເຫດສົມຜົນ, ການຮັກສາສະພາບແວດລ້ອມ PCR ທີ່ດີ, ການສ້າງມາດຕະຖານຂັ້ນຕອນການປະຕິບັດ PCR, ແລະການປູກຈິດສໍານຶກການປະຕິບັດຢ່າງເຂັ້ມງວດຂອງນັກທົດລອງແມ່ນກຸນແຈເພື່ອປ້ອງກັນຫຼືຫຼຸດຜ່ອນມົນລະພິດຂອງການທົດລອງ PCR.