• ເຟສບຸກ
  • ລິ້ງຄ໌
  • youtube

ພູມຕ້ານທານ, ເອີ້ນວ່າ immunoglobulins (Ig), ແມ່ນ glycoproteins ທີ່ຜູກມັດໂດຍສະເພາະກັບ antigens.
 
ການກະກຽມພູມຕ້ານທານແບບດັ້ງເດີມແມ່ນຜະລິດໂດຍການສັກຢາປ້ອງກັນສັດແລະການເກັບກໍາ antiserum.ດັ່ງນັ້ນ, antiserum ປົກກະຕິແລ້ວມີພູມຕ້ານທານຕໍ່ກັບ antigens ທີ່ບໍ່ກ່ຽວຂ້ອງອື່ນໆແລະອົງປະກອບຂອງທາດໂປຼຕີນອື່ນໆໃນ serum.ໂມເລກຸນ antigen ທົ່ວໄປສ່ວນຫຼາຍແມ່ນປະກອບດ້ວຍຫຼາຍ epitopes ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ດັ່ງນັ້ນ, ພູມຕ້ານທານທໍາມະດາຍັງເປັນການປະສົມຂອງພູມຕ້ານທານຕໍ່ກັບ epitopes ທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍ.ເຖິງແມ່ນວ່າພູມຕ້ານທານຂອງເຊລັມແບບດັ້ງເດີມທີ່ມຸ້ງໄປສູ່ epitope ດຽວກັນກໍ່ຍັງປະກອບດ້ວຍພູມຕ້ານທານທີ່ເກີດຈາກເຊື້ອແບັກທີເຣັຍທີ່ຜະລິດໂດຍໂຄນຈຸລັງ B ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.ດັ່ງນັ້ນ, ພູມຕ້ານທານໃນເຊລັມແບບດັ້ງເດີມຍັງເອີ້ນວ່າ polyclonal antibodies, ຫຼື polyclonal antibodies ສໍາລັບສັ້ນ.
 
ພູມຕ້ານທານ monoclonal (ພູມຕ້ານທານ monoclonal) ແມ່ນພູມຕ້ານທານທີ່ມີເອກະພາບສູງທີ່ຜະລິດໂດຍໂຄນ B cell ດຽວແລະພຽງແຕ່ມຸ້ງໄປຫາ epitope ສະເພາະ.ປົກກະຕິແລ້ວມັນຖືກກະກຽມໂດຍເທກໂນໂລຍີ hybridoma - ເທກໂນໂລຍີ hybridoma antibody ແມ່ນອີງໃສ່ເທກໂນໂລຍີການລວມຕົວຂອງເຊນ, ການລວມເອົາເຊນ B ທີ່ມີຄວາມສາມາດໃນການ secrete antibodies ສະເພາະແລະຈຸລັງ myeloma ທີ່ມີຄວາມສາມາດໃນການເຕີບໂຕທີ່ບໍ່ມີຂອບເຂດເຂົ້າໄປໃນລູກປະສົມຂອງ B-cell .ຈຸລັງລູກປະສົມນີ້ມີລັກສະນະຂອງຈຸລັງແມ່.ມັນ​ສາ​ມາດ​ແຜ່​ຂະ​ຫຍາຍ​ຢ່າງ​ບໍ່​ມີ​ກໍາ​ນົດ​ແລະ​ເປັນ​ອະ​ມະ​ຕະ​ໃນ vitro ເຊັ່ນ​: ຈຸ​ລັງ myeloma​, ແລະ​ມັນ​ສາ​ມາດ​ສັງ​ເຄາະ​ແລະ​ຄວາມ​ລັບ​ຂອງ​ພູມ​ຕ້ານ​ທານ​ສະ​ເພາະ​ເຊັ່ນ lymphocytes splenic​.ໂດຍຜ່ານການ cloning, ສາຍ monoclonal ທີ່ມາຈາກຈຸລັງ hybridoma ດຽວ, ນັ້ນແມ່ນ, ເສັ້ນຈຸລັງ hybridoma, ສາມາດໄດ້ຮັບ.ພູມຕ້ານທານທີ່ມັນຜະລິດແມ່ນພູມຕ້ານທານທີ່ມີເອກະພາບສູງຕໍ່ກັບຕົວກໍານົດ antigenic ດຽວກັນ, ນັ້ນແມ່ນ, ພູມຕ້ານທານ monoclonal.
 
ພູມຕ້ານທານມີຢູ່ໃນ monomers ຮູບ Y ຫຼືຫຼາຍອັນ (ເຊັ່ນ, ພູມຕ້ານທານ monoclonal ຫຼື polyclonal antibodies).ແຕ່ລະ monomer ຮູບຊົງ Y ແມ່ນປະກອບດ້ວຍ 4 ຕ່ອງໂສ້ polypeptide, ລວມທັງຕ່ອງໂສ້ຫນັກສອງອັນດຽວກັນແລະສອງຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງທີ່ຄືກັນ.ລະ​ບົບ​ຕ່ອງ​ໂສ້​ແສງ​ສະ​ຫວ່າງ​ແລະ​ຕ່ອງ​ໂສ້​ຫນັກ​ແມ່ນ​ມີ​ຊື່​ຕາມ​ນ​້​ໍ​າ​ໂມ​ເລ​ກຸນ​ຂອງ​ເຂົາ​ເຈົ້າ​.ດ້ານເທິງຂອງໂຄງສ້າງຮູບ Y ແມ່ນພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້, ເຊິ່ງເປັນສະຖານທີ່ຜູກມັດ antigen.(ຄັດມາຈາກແນວຄວາມຄິດຂອງ Detai Bio-Monoclonal Antibody)
 
ໂຄງສ້າງພູມຕ້ານທານ
1ຕ່ອງໂສ້ຫນັກ
ມີຫ້າປະເພດຂອງ mammalian ລະບົບຕ່ອງໂສ້ຫນັກ Ig, ມີຊື່ດ້ວຍຕົວອັກສອນກເຣັກ α, δ, ε, γ, ແລະ μ.ພູມຕ້ານທານທີ່ສອດຄ້ອງກັນເອີ້ນວ່າ IgA, IgD, IgE, IgG, ແລະ IgM.ຕ່ອງໂສ້ຫນັກທີ່ແຕກຕ່າງກັນແຕກຕ່າງກັນໃນຂະຫນາດແລະອົງປະກອບ.α ແລະ γ ມີປະມານ 450 ອາຊິດ amino, ໃນຂະນະທີ່ μ ແລະ ε ມີປະມານ 550 ອາຊິດ amino.
ແຕ່ລະລະບົບຕ່ອງໂສ້ຫນັກມີສອງຂົງເຂດ: ພາກພື້ນຄົງທີ່ແລະພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້.ພູມຕ້ານທານທັງຫມົດຂອງປະເພດດຽວກັນມີພາກພື້ນຄົງທີ່ດຽວກັນ, ແຕ່ມີຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງພູມຕ້ານທານຂອງປະເພດຕ່າງໆ.ພາກພື້ນຄົງທີ່ຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ຫນັກ γ, α, ແລະ δ ປະກອບດ້ວຍສາມໂດເມນ Ig ໃນ tandem, ມີພາກພື້ນ hinge ເພື່ອເພີ່ມຄວາມຍືດຫຍຸ່ນຂອງມັນ;ພາກພື້ນຄົງທີ່ຂອງຕ່ອງໂສ້ຫນັກ μ ແລະ ε ແມ່ນປະກອບດ້ວຍ 4 ໂດເມນ Ig.ພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ຫນັກຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ຜະລິດໂດຍຈຸລັງ B ທີ່ແຕກຕ່າງກັນແມ່ນແຕກຕ່າງກັນ, ແຕ່ພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ຜະລິດໂດຍຈຸລັງ B ຫຼືໂຄນຈຸລັງດຽວກັນແມ່ນຄືກັນ, ແລະພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ຂອງແຕ່ລະຕ່ອງໂສ້ຫນັກແມ່ນປະມານ 110 ອາຊິດ amino ໃນຄວາມຍາວ., ແລະປະກອບເປັນໂດເມນ Ig ດຽວ.
 
ຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງ
ມີສາຍຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງພຽງແຕ່ສອງຊະນິດໃນສັດລ້ຽງລູກດ້ວຍນົມ: ປະເພດ lambda ແລະປະເພດ kappa.ແຕ່ລະສາຍຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງມີສອງໂດເມນທີ່ເຊື່ອມຕໍ່ກັນ: ພາກພື້ນຄົງທີ່ແລະພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້.ຄວາມ​ຍາວ​ຂອງ​ຕ່ອງ​ໂສ້​ແສງ​ແມ່ນ​ປະ​ມານ 211 ~ 217 ອາ​ຊິດ amino​.ສາຍຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງສອງອັນທີ່ບັນຈຸຢູ່ໃນແຕ່ລະພູມຕ້ານທານແມ່ນສະເຫມີຄືກັນ.ສໍາລັບສັດລ້ຽງລູກດ້ວຍນົມ, ສາຍຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງໃນແຕ່ລະພູມຕ້ານທານມີພຽງແຕ່ຫນຶ່ງປະເພດ: kappa ຫຼື lambda.ໃນບາງສັດທີ່ມີກະດູກສັນຫຼັງຕ່ໍາ, ເຊັ່ນ: ປາ cartilaginous (ປາ cartilage) ແລະປາກະດູກ, ປະເພດອື່ນໆຂອງສາຍຕ່ອງໂສ້ແສງສະຫວ່າງເຊັ່ນ: ປະເພດ iota (iota) ແມ່ນຍັງພົບເຫັນ.
 
ສ່ວນ Fab ແລະ Fc
ພາກສ່ວນ Fc ສາມາດຖືກລວມໂດຍກົງກັບ enzymes ຫຼືສີຍ້ອມ fluorescent ເພື່ອຕິດປ້າຍແອນຕິບໍດີ.ມັນແມ່ນສ່ວນທີ່ພູມຕ້ານທານ rivets ເທິງແຜ່ນໃນລະຫວ່າງການຂະບວນການ ELISA, ແລະມັນຍັງເປັນສ່ວນທີ່ antibody ທີສອງຖືກຮັບຮູ້ແລະຜູກມັດໃນ immunoprecipitation, immunoblotting ແລະ immunohistochemistry.ພູມຕ້ານທານສາມາດຖືກ hydrolyzed ເປັນສອງສ່ວນ F (ab) ແລະຫນຶ່ງສ່ວນ Fc ໂດຍ enzymes proteolytic ເຊັ່ນ papain, ຫຼືພວກເຂົາສາມາດແຍກອອກຈາກເຂດ hinge ໂດຍ pepsin ແລະ hydrolyzed ເປັນຫນຶ່ງ F(ab)2 segment ແລະຫນຶ່ງ Fc segment.ຊິ້ນຂອງພູມຕ້ານທານ IgG ບາງຄັ້ງກໍ່ມີປະໂຫຍດຫຼາຍ.ເນື່ອງຈາກການຂາດສ່ວນ Fc, ພາກສ່ວນ F(ab) ຈະບໍ່ precipitate ກັບ antigen, ແລະມັນຈະຖືກຈັບໂດຍຈຸລັງພູມຕ້ານທານໃນການສຶກສາ vivo.ເນື່ອງຈາກຊິ້ນໂມເລກຸນຂະຫນາດນ້ອຍແລະຂາດການທໍາງານຂອງການເຊື່ອມໂຍງຂ້າມ (ເນື່ອງຈາກການຂາດສ່ວນ Fc), ສ່ວນ Fab ປົກກະຕິແລ້ວຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບ radiolabeling ໃນການສຶກສາທີ່ເປັນປະໂຫຍດ, ແລະສ່ວນ Fc ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ເປັນຕົວສະກັດກັ້ນໃນ staining histochemical.
 
ພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ແລະຄົງທີ່
ພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ (V region) ຢູ່ທີ່ 1/5 ຫຼື 1/4 (ປະກອບດ້ວຍປະມານ 118 ອາຊິດ amino residues) ຂອງຕ່ອງໂສ້ H ໃກ້ກັບ N-terminus ແລະ 1/2 (ມີປະມານ 108-111 ອາຊິດ amino residues) ຢູ່ໃກ້ກັບ N-terminus ຂອງຕ່ອງໂສ້ L.ແຕ່ລະຂົງເຂດ V ມີວົງແຫວນ peptide ທີ່ສ້າງຂຶ້ນໂດຍພັນທະບັດ disulfide ພາຍໃນລະບົບຕ່ອງໂສ້, ແລະແຕ່ລະວົງແຫວນ peptide ມີປະມານ 67 ຫາ 75 ອາຊິດ amino residue.ອົງປະກອບແລະການຈັດລຽງຂອງອາຊິດ amino ໃນພາກພື້ນ V ກໍານົດຄວາມສະເພາະຂອງການຜູກມັດ antigen ຂອງພູມຕ້ານທານ.ເນື່ອງຈາກຊະນິດທີ່ມີການປ່ຽນແປງຕະຫຼອດໄປແລະລໍາດັບຂອງອາຊິດ amino ໃນພາກພື້ນ V, ຫຼາຍໆຊະນິດຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ມີລັກສະນະຜູກມັດທີ່ແຕກຕ່າງກັນສາມາດສ້າງໄດ້.ພາກພື້ນ V ຂອງຕ່ອງໂສ້ L ແລະຕ່ອງໂສ້ H ຖືກເອີ້ນວ່າ VL ແລະ VH, ຕາມລໍາດັບ.ໃນ VL ແລະ VH, ອົງປະກອບຂອງອາຊິດ amino ແລະລໍາດັບຂອງບາງທ້ອງຖິ່ນມີລະດັບການປ່ຽນແປງທີ່ສູງກວ່າ.ພາກພື້ນເຫຼົ່ານີ້ເອີ້ນວ່າພາກພື້ນ hypervariable (HVR).ອົງປະກອບຂອງອາຊິດ amino ແລະການຈັດລຽງຂອງພາກສ່ວນທີ່ບໍ່ແມ່ນ HVR ໃນພາກພື້ນ V ແມ່ນຂ້ອນຂ້າງອະນຸລັກ, ເຊິ່ງເອີ້ນວ່າພາກພື້ນກອບ.ມີສາມພາກພື້ນ hypervariable ໃນ VL, ປົກກະຕິແລ້ວຕັ້ງຢູ່ໃນ residues ອາຊິດ amino 24 ຫາ 34 ແລະ 89 ຫາ 97 ຕາມລໍາດັບ.ສາມ HVR ຂອງ VL ແລະ VH ຖືກເອີ້ນວ່າ HVR1, HVR2 ແລະ HVR3, ຕາມລໍາດັບ.ການຄົ້ນຄວ້າແລະການວິເຄາະຂອງ X-ray crystal diffraction ໄດ້ພິສູດວ່າພາກພື້ນ hypervariable ທີ່ແທ້ຈິງແມ່ນບ່ອນທີ່ antigen antibody ຜູກມັດ, ສະນັ້ນມັນຖືກເອີ້ນວ່າພາກພື້ນກໍານົດ complementarity (CDR).HVR1, HVR2 ແລະ HVR3 ຂອງ VL ແລະ VH ສາມາດເອີ້ນວ່າ CDR1, CDR2 ແລະ CDR3 ຕາມລໍາດັບ.ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, CDR3 ມີລະດັບທີ່ສູງກວ່າຂອງ hypervariability.ພາກພື້ນ hypervariable ຍັງເປັນສະຖານທີ່ຕົ້ນຕໍທີ່ຕົວກໍານົດ idiotypic ຂອງໂມເລກຸນ Ig.ໃນກໍລະນີຫຼາຍທີ່ສຸດ, ລະບົບຕ່ອງໂສ້ H ມີບົດບາດສໍາຄັນກວ່າໃນການຜູກມັດກັບ antigen.
2ພາກ​ພື້ນ​ຄົງ​ທີ່ (C ພາກ​ພື້ນ​)ຕັ້ງຢູ່ 3/4 ຫຼື 4/5 (ປະມານຈາກອາຊິດ amino 119 ເຖິງ C terminus) ຂອງຕ່ອງໂສ້ H ໃກ້ກັບປາຍ C ແລະ 1/2 (ມີປະມານ 105 ອາຊິດ amino residues) ໃກ້ C terminus ຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ L.ແຕ່ລະພາກພື້ນທີ່ມີປະໂຫຍດຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ H ມີປະມານ 110 ອາຊິດ amino residue, ແລະມີວົງແຫວນ peptide ປະກອບດ້ວຍ 50-60 ອາຊິດ amino residues ທີ່ເຊື່ອມຕໍ່ໂດຍພັນທະບັດ disulfide.ອົງປະກອບຂອງອາຊິດ amino ແລະການຈັດລຽງຂອງພາກພື້ນນີ້ແມ່ນຂ້ອນຂ້າງຄົງທີ່ໃນສັດດຽວກັນ Ig isotype L chain ແລະຕ່ອງໂສ້ H ປະເພດດຽວກັນ.ດຽວກັນ, ມັນສາມາດຜູກມັດໂດຍສະເພາະກັບ antigen ທີ່ສອດຄ້ອງກັນ, ແຕ່ໂຄງສ້າງຂອງພາກພື້ນ C ຂອງມັນຄືກັນ, ນັ້ນແມ່ນ, ມັນມີ antigenicity ດຽວກັນ.ມ້າ anti-human IgG ພູມຕ້ານທານຂັ້ນສອງ (ຫຼື anti-antibody) ສາມາດຖືກລວມເຂົ້າກັບທັງສອງ A ປະສົມປະສານຂອງພູມຕ້ານທານ (IgG) ຕ້ານ exotoxins ທີ່ແຕກຕ່າງກັນເກີດຂຶ້ນ.ນີ້ແມ່ນພື້ນຖານທີ່ສໍາຄັນສໍາລັບການກະກຽມພູມຕ້ານທານຂັ້ນສອງແລະນໍາໃຊ້ fluorescein, ໄອໂຊໂທບ, enzymes ແລະພູມຕ້ານທານທີ່ມີປ້າຍຊື່ອື່ນໆ.
 
 
ຜະ​ລິດ​ຕະ​ພັນ​ທີ່​ກ່ຽວ​ຂ້ອງ:
ຊຸດ Cell Direct RT-qPCR

 

 


ເວລາປະກາດ: ກັນຍາ-30-2021