Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Reagent (ຫາງຫນູ) (ສໍາລັບການ Genotyping)
ລາຍລະອຽດ
ຊຸດນີ້ໃຊ້ລະບົບ lysis buffer ທີ່ເປັນເອກະລັກເພື່ອປົດປ່ອຍ DNA genomic ຢ່າງໄວວາຈາກຫາງຫນູ, ຫູ, ກ້າມເນື້ອແລະຕົວຢ່າງເນື້ອເຍື່ອອື່ນໆສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR, ດັ່ງນັ້ນມັນເຫມາະສົມໂດຍສະເພາະສໍາລັບການທົດສອບພັນທຸກໍາຂະຫນາດໃຫຍ່.
ຂະບວນການປ່ອຍ DNA genomic ຈາກ lysis buffer ແມ່ນສໍາເລັດພາຍໃນ 10-30 ນາທີຢູ່ທີ່ 65 ° C.ບໍ່ມີຂະບວນການອື່ນໆເຊັ່ນ: ການກໍາຈັດທາດໂປຼຕີນແລະ RNA, ແລະ DNA ຮ່ອງຮອຍທີ່ປ່ອຍອອກມາສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເປັນແມ່ແບບສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR.
2× M1-PCR ງ່າຍTMMix (UNG) ໃຊ້ dUTP ແທນ dTTP ບົນພື້ນຖານຂອງ 2× M1-PCR EasyTM ປະສົມ (UNG), ແລະເພີ່ມ enzyme UNG (Uracil-N-glycosylase) ທີ່ສາມາດທໍາລາຍແມ່ແບບທີ່ມີ dUTP ໃນເວລາດຽວກັນ.ກ່ອນທີ່ຈະປະຕິກິລິຍາ PCR, ເອນໄຊ UNG ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອທໍາລາຍຜະລິດຕະພັນ PCR ທີ່ມີ uracil.ເອນໄຊ UNG ຈະບໍ່ມີຜົນກະທົບໃດໆກ່ຽວກັບແມ່ແບບທີ່ບໍ່ມີ uracil, ດັ່ງນັ້ນການຮັບປະກັນຄວາມສະເພາະແລະຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການຂະຫຍາຍແລະປ້ອງກັນຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງການທົດສອບທາງພັນທຸກໍາຂະຫນາດໃຫຍ່.ການປົນເປື້ອນຂອງຜະລິດຕະພັນ PCR ເກີດຂຶ້ນ.
D-Taq DNA polymerase ແມ່ນ DNA polymerase ພິເສດທີ່ພັດທະນາໂດຍ Foregene ສໍາລັບປະຕິກິລິຍາ PCR ໂດຍກົງ.D-Taq DNA polymerase ມີຄວາມທົນທານຕໍ່ຕົວຍັບຍັ້ງປະຕິກິລິຢາ PCR ຫຼາຍຊະນິດ, ແລະສາມາດຂະຫຍາຍຈໍານວນ TRACE ຂອງ DNA ໃນລະບົບຕິກິຣິຍາທີ່ສັບສົນຕ່າງໆຢ່າງມີປະສິດທິພາບ, ແລະຄວາມໄວການຂະຫຍາຍສາມາດບັນລຸ 2Kb / ນາທີ, ເຊິ່ງເຫມາະສົມໂດຍສະເພາະສໍາລັບການຕິກິຣິຍາ PCR ໂດຍກົງ.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
ອົງປະກອບຊຸດ
ສ່ວນ I | Buffer MP |
Foregene Protease Plus | |
6× DNA Loading Buffer | |
ພາກທີ II | 2× M1 PCR ງ່າຍTMປະສົມ(UNG) |
ຄໍາແນະນໍາ |
ຄຸນນະສົມບັດແລະຂໍ້ດີ
■ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງໃຊ້ເວລາໃນການຊໍາລະລ້າງ DNA ແລະລາຄາແພງ.
■ ຄວາມຕ້ອງການຕົວຢ່າງແມ່ນຂະຫນາດນ້ອຍ, ຫນ້ອຍເທົ່າທີ່ເນື້ອເຍື່ອຫນູ 5mg ຫຼືຫາງຫນູ 2-5mm ສາມາດທົດສອບໄດ້.
■ບໍ່ຈໍາເປັນຕ້ອງມີການປິ່ນປົວພິເສດເຊັ່ນ: ການຂັດແລະການຂັດ, ແລະການດໍາເນີນງານແມ່ນງ່າຍດາຍ.
■ ລະບົບ PCR ທີ່ດີທີ່ສຸດເຮັດໃຫ້ PCR ມີຄວາມສະເພາະທີ່ສູງຂຶ້ນ ແລະມີຄວາມທົນທານຕໍ່ກັບປະຕິກິລິຢາຍັບຍັ້ງ PCR.
■ ລະບົບ PCR ຕ້ານມົນລະພິດ 2×M1-PCR ງ່າຍTMປະສົມ (UNG), ເຊິ່ງປະສິດທິຜົນກໍາຈັດມົນລະພິດທີ່ເກີດຈາກຜະລິດຕະພັນ PCR ແລະຮັບປະກັນຄວາມສະເພາະແລະຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການຂະຫຍາຍ.
ຕົວກໍານົດການຊຸດ
ຂອບເຂດການນໍາໃຊ້: ຫາງຫນູ, ຫູຫນູ, ກ້າມເນື້ອແລະເນື້ອເຍື່ອອື່ນໆ.
DNA ປ່ອຍອອກມາຈາກຕົວຢ່າງ lysis: ໃຊ້ເປັນແມ່ແບບ PCR ເທົ່ານັ້ນ.
ຊຸດສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອຈຸດປະສົງດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້: ການກໍານົດຕົວຂອງ transgenosis, genotyping ສັດ, ແລະອື່ນໆ.
ກະແສວຽກ
ການເກັບຮັກສາແລະອາຍຸການເກັບຮັກສາ
ສ່ວນ I ຂອງຊຸດນີ້ຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ 2-8 ℃.
The reagent Buffer AL ສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ສໍາລັບ 12 ເດືອນພາຍໃຕ້ສະພາບແຫ້ງແລ້ງ;ມັນສາມາດໄດ້ຮັບການເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 2-8 ℃ສໍາລັບການເກັບຮັກສາທີ່ຍາວກວ່າ.
Reagent Foregene Protease ມີສູດທີ່ເປັນເອກະລັກ.ເພື່ອຮັບປະກັນກິດຈະກໍາແລະຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງມັນ, ກະລຸນາເກັບຮັກສາມັນຢູ່ທີ່ 4 ℃ສໍາລັບ 12 ເດືອນ.
Reagent 6×DNA Loading Buffer ສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 4℃ ຫຼື -20℃ ເປັນເວລາດົນນານ.
ພາກທີ II ຂອງຊຸດນີ້ຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -20 ℃.
Reagent 2×M1 PCR EasyTM Mix(UNG), ຖ້າຖືກນໍາໃຊ້ເລື້ອຍໆ, ມັນຍັງສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ 4 ℃ສໍາລັບການເກັບຮັກສາໄລຍະສັ້ນ (ໃຊ້ໄດ້ພາຍໃນ 10 ມື້).