Lnc-RT Heroᵀᴹ I (ດ້ວຍ gDNase)(Super Premix ສໍາລັບການສັງເຄາະ cDNA strand ທໍາອິດຈາກ lncRNA)
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (ດ້ວຍ gDNase) ເປັນລະບົບການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນທີ່ຖືກພັດທະນາໂດຍສະເພາະສໍາລັບ lncRNA ເພື່ອກໍາຈັດການປົນເປື້ອນຂອງ DNA genomic ຢ່າງໄວວາ.5×gDNase Mix ສາມາດເອົາ genome ທີ່ຍັງເຫຼືອຢູ່ໃນ RNA ໄດ້ໄວຢູ່ທີ່ 42°C ເປັນເວລາ 2 ນາທີ, ຫຼີກເວັ້ນການແຊກແຊງຂອງ genome ໃນຜົນໄດ້ຮັບ qPCR.
5 × L-RT HeroTM Mix ປະກອບດ້ວຍ Foregene LncRNA Reverse Transcriptase ທີ່ຖືກພັດທະນາໂດຍສະເພາະໂດຍ Foregene, ເຊິ່ງເປັນປະເພດໃຫມ່ຂອງ reverse transcriptase ໂດຍສະເພາະສໍາລັບ lncRNA ແລະແມ່ແບບສະລັບສັບຊ້ອນ RNA ຍາວອື່ນໆ, ມີຄວາມສໍາພັນຂອງ RNA ທີ່ເຂັ້ມແຂງແລະປະສິດທິພາບການບັນທຶກການປີ້ນກັນທີ່ສູງຂຶ້ນ.ລະບົບການເພີ່ມປະສິດທິພາບເຮັດໃຫ້ອັດຕາການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນໄວຂຶ້ນແລະສາມາດຖອດຂໍ້ຄວາມແບບ RNA ໄດ້ງ່າຍດ້ວຍເນື້ອຫາ GC ສູງແລະໂຄງສ້າງຂັ້ນສອງທີ່ສັບສົນ.ການສັງເຄາະ cDNA ສາຍທຳອິດສາມາດສຳເລັດໄດ້ທີ່ 42°C ພາຍໃນ 15 ນາທີ.
ອົງປະກອບຊຸດ
| 5× gDNase ປະສົມ |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-Free ddH2O |
| ຄໍາແນະນໍາ |
ຄຸນນະສົມບັດແລະຂໍ້ດີ
■ຄວາມສາມາດໃນການກໍາຈັດ gDNA ທີ່ມີປະສິດທິພາບ, ເຊິ່ງສາມາດເອົາ gDNA ໃນແມ່ແບບພາຍໃນ 2 ນາທີ.
■ ມັນສາມາດປີ້ນການຖອດຂໍ້ຄວາມຂອງ lncRNA ໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ.ເມື່ອຜະລິດຕະພັນການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບແມ່ນຂຶ້ນກັບ qPCR, ຄ່າ Ct ແມ່ນຕໍ່າກວ່າລະບົບການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນແບບທຳມະດາ.
■ ລະບົບການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນທີ່ມີປະສິດທິພາບ, ມັນໃຊ້ເວລາພຽງ 15 ນາທີເພື່ອສຳເລັດການສັງເຄາະຂອງ cDNA ສາຍທຳອິດ.
■ແມ່ແບບທີ່ຊັບຊ້ອນ: ແມ່ແບບທີ່ມີເນື້ອໃນ GC ສູງແລະໂຄງສ້າງຮອງທີ່ສະລັບສັບຊ້ອນຍັງສາມາດຖືກຖອນຄືນດ້ວຍປະສິດທິພາບສູງ.
■ ລະບົບການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ, ແມ່ແບບລະດັບ pg ສາມາດໄດ້ຮັບ cDNA ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ.
■ ລະບົບການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນມີສະຖຽນລະພາບຄວາມຮ້ອນສູງ, ອຸນຫະພູມຕິກິຣິຍາທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນ 42℃, ແລະມັນຍັງມີປະສິດທິພາບການຖອດຂໍ້ຄວາມປີ້ນກັບກັນທີ່ດີຢູ່ທີ່ 50℃.
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຊຸດ
lncRNA ການວິເຄາະປະລິມານທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ.
lncRNA ການວິເຄາະປະລິມານຢ່າງແທ້ຈິງ.
ມັນສາມາດວິເຄາະການຕິດຕາມ RNA ຢ່າງວ່ອງໄວແລະຖືກຕ້ອງເຊັ່ນ RNA virus.
ການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບແມ່ແບບ RNA ທີ່ມີເນື້ອໃນ GC ສູງ ຫຼືໂຄງສ້າງຮອງທີ່ຊັບຊ້ອນ.
ກະແສວຽກ
ການເກັບຮັກສາແລະອາຍຸການເກັບຮັກສາ
ຊຸດຄວນຈະຖືກເກັບໄວ້ຢູ່ທີ່ -20°C. ເກັບຮັກສາຜະລິດຕະພັນໃນຕູ້ເຢັນອຸນຫະພູມຄົງທີ່ຢູ່ທີ່ -20°C ທັນທີຫຼັງຈາກໄດ້ຮັບ.ຖ້າເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາແມ່ນເຫມາະສົມ, ຜະລິດຕະພັນຈະບໍ່ຫຼຸດລົງການປະຕິບັດໃດໆໃນໄລຍະເວລາ 1 ປີ.
ຄູ່ມືການວິເຄາະບັນຫາ
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-ການຂະຫຍາຍສະເພາະ
1. ການອອກແບບ primer ບໍ່ສົມເຫດສົມຜົນ
ຄໍາແນະນໍາ: ການອອກແບບ primers ຕາມຫຼັກການການອອກແບບ primer.
2. ສານຕົກຄ້າງຂອງ Genome.
ຄໍາແນະນໍາ: ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າຂັ້ນຕອນທໍາອິດຂອງ gDNA ອຸນຫະພູມຕິກິຣິຍາການໂຍກຍ້າຍແມ່ນ 42°C, ແລະເວລາຕິກິຣິຍາຍັງສາມາດໄດ້ຮັບການຂະຫຍາຍເປັນ 5 ນາທີ.
ບໍ່ມີສັນຍານການຂະຫຍາຍໂດຍ RT-qPCR
1. RNA ຖືກທໍາລາຍ.
ຄໍາແນະນໍາ: ວັດສະດຸສໍາລັບການສະກັດ RNA ຄວນຈະສົດເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້, ແລະ RNA ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງແລະມີຄວາມບໍລິສຸດສູງຄວນຖືກນໍາໃຊ້.
2. RNA ມີສານຍັບຍັ້ງ.
ຄໍາແນະນໍາ: ຕົວຍັບຍັ້ງການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບກົງກັນຂ້າມໂດຍທົ່ວໄປປະກອບມີ SDS, ເກືອ guanidine, EDTA, ແລະອື່ນໆ. ມັນແນະນໍາໃຫ້ລ້າງ RNA precipitate ດ້ວຍ 70% ethanol ເພື່ອເອົາ inhibitors.
3. ບັນຫາການອອກແບບ primer.
ຄໍາແນະນໍາ: ອີງຕາມຫຼັກການການອອກແບບ primer, ອອກແບບ primers ໃຫມ່ສໍາລັບການກວດກາ.
ແຖບເປົ້າຫມາຍປາກົດຢູ່ໃນການຄວບຄຸມເປົ່າ
1. ການປົນເປື້ອນຂອງເຄື່ອງມືປະຕິບັດການຫຼື reagents.
ຄໍາແນະນໍາ: ທາດປະຕິກອນ ຫຼືອຸປະກອນທັງໝົດສຳລັບການທົດລອງຄວນຈະຖືກອົບອັດຕະໂນມັດ.ຈົ່ງລະມັດລະວັງ ແລະ ອ່ອນໂຍນໃນເວລາຈັບເພື່ອປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ຕົວຢ່າງ DNA ຖືກດູດເຂົ້າໄປໃນທໍ່ ຫຼື ຮົ່ວອອກຈາກທໍ່ centrifuge.
2. ການປົນເປື້ອນເກີດຂຶ້ນໃນລະຫວ່າງການກະກຽມລະບົບປະຕິກິລິຢາ PCR.
ຄຳແນະນຳ: ຄວນລະມັດລະວັງໃນການຈັບມື, ເຊັ່ນ: ໃສ່ຖົງມືຢາງ, ໃຊ້ຄຳແນະນຳການກັ່ນຕອງ.ໃຊ້ PCR Mix ແບບ Real Time ໃນລະບົບປ້ອງກັນການປົນເປື້ອນ.
3. primers ແມ່ນຊຸດໂຊມ.
ຄຳແນະນຳ: ໃຊ້ SDS-PAGE electrophoresis ເພື່ອກວດຫາວ່າ primers ມີການເສື່ອມໂຊມຫຼືບໍ່, ແລະປ່ຽນແທນດ້ວຍ primers ໃໝ່ ສໍາລັບການທົດລອງກວດຫາ fluorescence.
ຄູ່ມືການສອນ:
Lnc-RT HeroTM I(With gDNase)(Super Premix ສຳລັບການສັງເຄາະ cDNA ສາຍທຳອິດຈາກ lncRNA) ຄູ່ມືການສອນ
