ຊຸດ ForeDirect RT-qPCR
ລາຍລະອຽດຊຸດ:
◮ສໍາລັບການຂະຫຍາຍ RNA ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງໂດຍກົງຈາກການລວບລວມ swab ໂດຍບໍ່ມີຂະບວນການເຮັດຄວາມສະອາດ RNA.ຊຸດນີ້ເຮັດຮອບວຽນ qRT-PCR ພາຍໃນຫນຶ່ງຊົ່ວໂມງ.ການປະສົມ enzyme ແມ່ນການຜະສົມຜະສານທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Reaction Buffer ມີອົງປະກອບທີ່ຕ້ອງການທັງໝົດ, ລວມທັງອົງປະກອບ buffer ທີ່ຖືກປັບໃຫ້ເໝາະສົມ, Mg2+, dUTP, ແລະ dNTPs.
ລາຍລະອຽດ
ForeDirect RT-qPCR Kit ຖືກອອກແບບມາສໍາລັບການຂະຫຍາຍ RNA ໃນເວລາທີ່ແທ້ຈິງໂດຍກົງຈາກການລວບລວມ swab ໂດຍບໍ່ມີຂະບວນການເຮັດຄວາມສະອາດ RNA.ຊຸດນີ້ເຮັດຮອບວຽນ qRT-PCR ພາຍໃນຫນຶ່ງຊົ່ວໂມງ.ການປະສົມ enzyme ແມ່ນການຜະສົມຜະສານທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Reaction Buffer ມີອົງປະກອບທີ່ຕ້ອງການທັງໝົດ, ລວມທັງອົງປະກອບ buffer ທີ່ຖືກປັບໃຫ້ເໝາະສົມ, Mg2+, dUTP, ແລະ dNTPs.
ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ
100T
ອົງປະກອບຊຸດ
| ທາດການປ່ອຍອາຊິດນິວຄລີອິກ |
| ປ້ອງກັນ RNA |
| 2× RT-qPCR Buffer |
| Enzyme Mixture(Taq&M-MLV) |
| ຄໍາແນະນໍາ |
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ PCR
1. ເມື່ອທໍ່ຕິກິຣິຍາ PCR ໄດ້ຖືກຈຸດສູນກາງໄລຍະສັ້ນໆ, ເອົາພວກມັນໃສ່ໃນຖັງຕົວຢ່າງຂອງເຄື່ອງມືຂະຫຍາຍ.
2. ອະນຸສັນຍາຄວາມຮ້ອນ
| ຂັ້ນຕອນ | ອຸນຫະພູມ | ເວລາ | ຮອບວຽນ | |
| 1 | ການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນ | 50 ℃ | 15 ນາທີ | 1 |
| 2 | ກ່ອນການເກີດຜິວໜັງ | 95℃ | 1 ນທ | 1 |
| 3 | ລັກສະນະ | 95℃ | 10 ວິນາທີ | 42 |
| 4 | Anneal/ການຂະຫຍາຍ | 60 ℃ | 30 ວິນາທີ | |
ຫມາຍເຫດ:ສັນຍານ fluorescent ຖືກກວດພົບທັນທີຫຼັງຈາກຂັ້ນຕອນການຂະຫຍາຍຂອງແຕ່ລະວົງຈອນ.
3. ຫຼັງຈາກການຕັ້ງຄ່າ, ບັນທຶກໄຟລ໌ແລະດໍາເນີນການໂຄງການຕິກິຣິຍາ.
ຂັ້ນຕອນການດໍາເນີນງານ
ກ່ອນທີ່ຈະກະກຽມ reagent, reagents ທັງຫມົດໃນຊຸດຄວນໄດ້ຮັບການ thawed ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງແລະປະສົມຄ່ອຍໆ.
ການກະກຽມ Reagent
1. ກະກຽມປະສົມການປ່ອຍອາຊິດນິວຄລີອິກ
| ອົງປະກອບ | ປະລິມານຕໍ່ຕົວຢ່າງຫຼືການຄວບຄຸມ |
| ທາດການປ່ອຍອາຊິດນິວຄລີອິກ | 5μL |
| ປ້ອງກັນ RNA | 0.5 ມລ |
2. ກະກຽມການປະສົມປະຕິກິລິຍາ
| ອົງປະກອບ | ປະລິມານຕໍ່ຕົວຢ່າງຫຼືການຄວບຄຸມ |
| 2× RT-qPCR Buffer | 15 ມລ |
| Enzyme Mixture(Taq&M-MLV) | 1.5 ມລ |
| Primers ແລະ Probes | 1μL |
ການເກັບຮັກສາແລະອາຍຸການເກັບຮັກສາ
- ຊຸດຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ຢູ່ທີ່ -20± 5℃.ໄລຍະເວລາທີ່ຖືກຕ້ອງແມ່ນ 12 ເດືອນ.
- ຫຼີກລ່ຽງຮອບວຽນແຊ່ແຂງຊ້ຳໆ (<5 ຮອບ).
